[发明专利]基于环介导等温扩增技术的金黄色葡萄球菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法有效
申请号: | 200910138327.4 | 申请日: | 2009-04-28 |
公开(公告)号: | CN101565753A | 公开(公告)日: | 2009-10-28 |
发明(设计)人: | 曹以诚;陈洵;李志勇;杜正平;谭慧媚;李心晖;王志强;高东微;邓小玲;柯昌文 | 申请(专利权)人: | 广州华峰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12R1/445 |
代理公司: | 广州粤高专利商标代理有限公司 | 代理人: | 陈 卫 |
地址: | 510663广东省广州市经济技*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 基于 环介导 等温 扩增 技术 金黄色 葡萄球菌 基因 快速 诊断 试剂盒 及其 检测 方法 | ||
1.一种金黄色葡萄球菌基因快速诊断试剂盒,其特征在于由两对 引物、Bst DNA聚合酶、反应液、稳定液、样品预处理液、显色液和 阳性对照液组成,以上七种液体分别置于容器中,
上述两对引物为:
外引物F3:TTTTCATAATCRATCACTGGAC;
外引物B3:TTTAACAGCTAAAGAGTTTGGT;
内引物FIP:ACAATAATAACGAGGTYATTGCAGCTTTTCTTG
AACACTTTCATAACAGGTAC;
内引物BIP:CCTTCAGCAAGCTTTAACTCATAGTTTTTCAGA
TAGCATGCCATACAGTC;
上述反应液含有1.6~2mmol/L dNTP、20~25mmol/L Tris-HCl、 10~12.5mmol/L氯化钾、10~12.5mmol/L硫酸铵、8~10mmol/L硫 酸镁、0.1~0.125%TritonX-100、0.8~1mol/L甜菜碱、内引物FIP/BI P各1.6~2mol/L和外引物F3/B3各0.2~0.25mol/L;
上述样品预处理液含有10~20mmol/L pH 8.0的Tris-HCl、1~2 mmol/L EDTA和1~1.2%Triton X-100;
上述阳性对照为金黄色葡萄球菌基因组DNA;
所述的显色液为SYBR Green I;
所述稳定液为石蜡油。
2.根据权利要求1所述试剂盒,其特征在于所述样品预处理液含 有20mmol/L pH 8.0的Tris-HCl、2mmol/L EDTA和1.2%Triton X-100。
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