[发明专利]转化破囊壶菌目微生物的产物和方法有效

专利信息
申请号: 200910141898.3 申请日: 2002-04-16
公开(公告)号: CN101760469A 公开(公告)日: 2010-06-30
发明(设计)人: 保罗·G·罗斯勒;T·戴夫·马修斯;汤姆·M·拉姆西尔;詹姆斯·G·梅茨 申请(专利权)人: 马泰克生物科学公司
主分类号: C12N15/60 分类号: C12N15/60;C12N1/15;C12N15/80;C12N15/87;C12N15/88;C12N15/89;C12N15/11;C12R1/645
代理公司: 北京市柳沈律师事务所 11105 代理人: 闵丹
地址: 美国马*** 国省代码: 美国;US
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摘要:
搜索关键词: 转化 破囊壶菌目 微生物 产物 方法
【权利要求书】:

1.分离的核酸分子,包含选自下列的核酸序列:

a.编码下述蛋白的核酸序列,该蛋白具有选自SEQ ID NO:15,SEQ IDNO:19,SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:24的氨基酸序列,其中所述蛋白为乙酰乳酸合酶;

b.编码下述蛋白的核酸序列,该蛋白具有与氨基酸序列(a)至少约75%相同的氨基酸序列,其中所述蛋白为乙酰乳酸合酶;和,

c.与核酸序列(a)或(b)完全互补的核酸序列。

2.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码具有与氨基酸序列(a)至少约85%相同的氨基酸序列的蛋白,并且其中所述蛋白为乙酰乳酸合酶。

3.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码具有与氨基酸序列(a)至少约95%相同的氨基酸序列的蛋白,并且其中所述蛋白为乙酰乳酸合酶。

4.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码具有与SEQID NO:15不同的氨基酸序列的蛋白,该不同是由于在选自116G,117A,192P,200A,251K,358M,383D,592V,595W或599F的氨基酸位置发生氨基酸缺失,插入或取代。

5.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码一种蛋白,该蛋白具有选自SEQ ID NO:15,SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:22或SEQ IDNO:24的氨基酸序列,并且其中所述蛋白为乙酰乳酸合酶。

6.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列选自SEQ ID NO:14的核苷酸1260-3314,SEQ ID NO:18的核苷酸1260-3314,SEQ ID NO:21的核苷酸1260-3314或SEQ ID NO:23的核苷酸1260-3314。

7.权利要求1的分离的核酸分子,其中蛋白(a)或(b)的表达赋予用所述核酸分子转化的破囊壶菌目微生物对选自如下的化合物降低的敏感性:磺酰脲化合物,咪唑啉酮类抑制剂,或嘧啶基羟苯甲酸盐。

8.权利要求7的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码具有选自SEQID NO:19,SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:24的氨基酸序列的蛋白。

9.权利要求7的分离的核酸分子,其中所述核酸序列选自SEQ ID NO:14的核苷酸1260-3314,SEQ ID NO:18的核苷酸1260-3314,SEQ ID NO:21的核苷酸1260-3314或SEQ ID NO:23的核苷酸1260-3314。

10.权利要求1的分离的核酸分子,其中所述核酸序列编码Schizochytrium乙酰乳酸合酶。

11.权利要求10的分离的核酸分子,其中所述Schizochytrium乙酰乳酸合酶的表达赋予用所述核酸分子转化的破囊壶菌目微生物对选自如下的化合物降低的敏感性:磺酰脲化合物,咪唑啉酮类抑制剂,或嘧啶基羟苯甲酸盐。

12.重组核酸分子,包含与转录控制序列可操作性连接的权利要求1的分离的核酸分子。

13.用权利要求12所述重组核酸分子转化的破囊壶菌目的重组微生物。

14.用于转化破囊壶菌目微生物的重组载体,包含编码乙酰乳酸合酶的核酸序列,该乙酰乳酸合酶赋予破囊壶菌目微生物对选自如下的化合物降低的敏感性:磺酰脲化合物,咪唑啉酮类抑制剂,或嘧啶基羟苯甲酸盐,其中所述乙酰乳酸合酶具有选自如下的氨基酸序列:

a.选自SEQ ID NO:19,SEQ ID NO:22或SEQ ID NO:24的氨基酸序列;和,

b.与氨基酸序列(a)至少约75%相同的氨基酸序列;

其中所述编码乙酰乳酸合酶的核酸序列与转录控制序列可操作性连接。

15.权利要求14的重组载体,其中所述重组载体是表达载体。

16.权利要求14的重组载体,其中所述重组载体靶向载体。

17.权利要求14的重组载体,其中所述核酸序列编码具有与氨基酸序列(a)至少约85%相同的氨基酸序列的乙酰乳酸合酶。

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