[发明专利]一种高产量的结冷胶发酵制备方法

权利要求书

1.一种高产量的结冷胶发酵制备方法，其包括以下步骤：

1)斜面菌种经扩大培养成摇瓶种子液；

2)将摇瓶种子液接入一级种子罐无菌培养基中扩大培养；

3)将一级种子罐中的种子液接入二级种子罐无菌培养基中扩大培养；

4)将二级种子罐中的种子液接入三级发酵罐无菌培养基中发酵培养；

5)收集结冷胶发酵液；

其中所述菌种为少动鞘氨醇单胞菌，并且在三级发酵罐中的培养过程中添加无菌水。

2.权利要求1的制备方法，其特征在于，摇瓶培养基的组成为：蛋白胨：0.3～0.6，牛肉膏0.2～0.4，酵母膏0.05～0.15，其余为水。

3.权利要求1的制备方法，其特征在于，摇瓶扩大培养的条件为：温度28-34℃，周期18～30h，摇床转速：150r/min。

4.权利要求1的制备方法，其特征在于，一级种子罐中的培养基组成为：酵母浸出汁：0.2～0.5，牛肉膏：0.3，鱼蛋白胨：0.5，DDFS-303：0.0003，其余为水；以重量/体积百分比计。

5.权利要求1的制备方法，其特征在于，一级种子罐中扩大培养的条件为：培养温度：28～34℃，通风比：1∶0.5，运行压力：0.05～0.08Mpa。

6.权利要求1的制备方法，其特征在于，一级种子罐扩大培养的终点为：周期：13～16h，pH值在8.2以上，氨基氮在350mg/Kg以上，OD520nm值0.1±0.02。

7.权利要求1的制备方法，其特征在于，二级种子罐中的培养基组成为：白糖：2.0～3.0，酵母浸出汁：0.1～0.3，大豆蛋白粉：0.2～0.4，KH₂PO₄：0.05，K₂PHO₄：0.05，MgSO₄：0.06，DDFS-303：0.0003，其余为水。

8.权利要求1的制备方法，其特征在于，二级种子罐的培养条件为：培养温度：28～34℃，通风比：1∶0.5，运行压力：0.05～0.08Mpa。

9.权利要求1的制备方法，其特征在于，二级种子罐扩大培养的终点为：周期：6～8h，pH值在6.0～6.6，氨基氮在40～80mg/Kg之间，OD520nm值0.4±0.02。

10.权利要求1的制备方法，其特征在于三级发酵罐中的培养基组成为：白糖：2.5～3.5，大豆蛋白粉：0.5～0.8，KH₂PO₄：0.1，MnSO₄·H₂O：0.025，K₂HPO₄：0.15，MgSO₄：0.06，DDFS-303：0.0003，H₃BO₃：0.003，其余为水。