[发明专利]玉米ae基因的分子标记及其获得方法和应用无效
申请号: | 200910144387.7 | 申请日: | 2009-08-06 |
公开(公告)号: | CN101619362A | 公开(公告)日: | 2010-01-06 |
发明(设计)人: | 程备久;陈枫;朱苏文;项艳;江海洋;马庆;李晓玉 | 申请(专利权)人: | 安徽农业大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12P19/34;A01H1/04 |
代理公司: | 安徽省合肥新安专利代理有限责任公司 | 代理人: | 何梅生 |
地址: | 230036安徽*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 玉米 ae 基因 分子 标记 及其 获得 方法 应用 | ||
1.一种玉米ae基因的分子标记,是用下列碱基组成的标记引物序列:
上游引物5′-TCATCTTCTCACATTGGTCTTCC-3′,
下游引物5′-GCTGTGCTATGGCCATGTTTAT-3′,自高直链淀粉玉米基因组DNA中扩增出来的核苷酸序列,片段大小为474bp,记为ae474标记。
2.根据权利要求1所述的一种玉米ae基因的分子标记获得方法,其特征是,以一种高直链淀粉玉米品种的基因组DNA为模板,利用PCR技术扩增高直链淀粉玉米ae突变基因,将扩增后所得片段回收、测序,得到全长序列,在高直链淀粉玉米ae基因第9和第10外显子之间,高直链淀粉玉米ae基因中第7424-7428bp碱基处设计的一对标记引物扩增高直链淀粉玉米基因组DNA,可以获得长度为474bp的片段,所述片段即为玉米ae基因紧密连锁的显性分子标记,记为ae474标记。
3.根据权利要求2所述的一种玉米ae基因的分子标记的获得方法,其特征是所述PCR扩增DNA基因反应程序为:94℃预变性5分钟;94℃变性30秒,52℃退火30秒,72℃延伸30秒,共35个循环;35个循环结束后,再对扩增DNA基因进行72℃延伸10分钟。
4.一种玉米ae基因的分子标记的应用,其特征是,利用权利要求1所述的标记引物序列对玉米品种DNA基因进行PCR扩增,若可特异性扩增得到一条474bp大小的条带,即判定所述玉米品种中含有ae基因。
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