[发明专利]瑞香狼毒提取物及其抗肿瘤作用

说明书

技术领域：

本发明涉及中药瑞香狼毒的新的提取物及其提取方法与用途。

背景技术：

瑞香狼毒(Stellera chamaejasme L.)为瑞香科狼毒属植物的根，是狼毒中的正品，始载于《神农本草经》，谓其性味辛、苦，平，有毒，入肺、肝、脾经，具有“逐水祛痰散结”的功能，主治“积聚饮食，寒热水气”。清·张志聪《本草崇原》注曰：“破积聚，则饮食壅滞而为寒热之病，亦可治矣。”孙思邈注：“积聚者，气道不行故耳。饮食寒热者，气失其治，气滞水蓄，此药辛可开之。”李时珍因其“有毒”故在《本草纲目》中将其列为下品。南北朝·梁·甄权的《药性论》定其性味为“苦，辛，有毒。”梁·陶弘景在《名医别录》中记载狼毒“除胸下积癖。”《圣惠方》以狼毒丸治积聚，心腹胀如鼓者，用狼毒为主药。《补阙肘后方》治卒心腹癥坚，两胁下有气结者，用狼毒为主药。

统计公元618-1911年间包含狼毒的方剂共约109张，其中以治疗痰证、积聚等疑难杂症者居多。在我国民间，也有不少利用狼毒治疗胃癌、肝癌、食管癌、乳腺癌肿瘤、甲状腺癌等恶性肿瘤的验方。临床上也有多篇文献报道，瑞香狼毒提取物治疗恶性肿瘤获得良效。现代医学研究发现其具有良好的抗肿瘤作用，故国内众多学者对该中药潜在的重要药用价值寄予厚望。

近年来，国内外来对瑞香狼毒化学与药理学研究方兴未艾。瑞香狼毒主要含有二萜类、香豆素类、木脂素类及黄酮类化学成分，其中瑞香烷类化合物等萜类化合物是该中药特有的且具备较好的抗肿瘤生物活性，目前尚未获得该类化合物的有效部位，

现有文献中的提取物有些属于治标不治本，有些使用价格昂贵的成分，有些在开发过程中由于疗效不确切而中断开发。

本发明提供了一种疗效确切、安全方便、副作用小、价格低廉的纯中药提取物。

发明内容：

本发明提供一种狼毒提取物，所述提取物采用无水乙醇提取，得到一级提取物，将一级提取物进一步采用大孔树脂柱或聚酰胺柱层析，用水和乙醇洗脱得到二级提取物，二级提取物中用大孔树脂柱分离的二级提取物进一步采用聚酰胺柱层析，用水和乙醇洗脱得到三级提取物，

全部三个级别的提取物均属于本发明的内容。

本发明的一级提取物制备方法如下：

狼毒药材加乙醇，回流提取，提取液减压回收乙醇，浓缩得到提取物2。

本发明的二级提取物制备方法如下：

提取物2上大孔树脂HPD100，依次用水、40％乙醇、80％乙醇洗脱，分别收集并分别浓缩得到提取物3、4、5。

提取物2上聚酰胺柱，依次用水、30％乙醇、60％乙醇、100％乙醇洗脱，分别收集并分别浓缩得到提取物15、16、17、18。

本发明的三级提取物制备方法如下：

取提取物5上聚酰胺柱，依次用水、30％乙醇、60％乙醇、100％乙醇洗脱，分别收集并分别浓缩得到提取物11、12、13、14。

本发明的一级提取物具体制备方法如下：

狼毒药材500g加无水乙醇2L，回流提取3次，每次2h，合并提取液，减压回收

乙醇，水浴干燥后，减压干燥(70℃)，得提取物2。

本发明的二级提取物具体制备方法如下：

狼毒药材2000g，加无水乙醇7L，回流提取3次，每次2h，合并提取液，减压浓缩至1/5体积，加等体积的水，挥发至无醇味，上大孔树脂HPD100(3.3kg)，依次用水、40％乙醇、80％乙醇各2.5倍柱体积洗脱，水浴干燥后，减压干燥(70℃)，分别得到提取物3、4、5。

提取物2(10.0g)上聚酰胺柱(柱体积900ml，约280g，聚酰胺预处理)，依次用水、30％乙醇、60％乙醇、100％乙醇分别洗3个柱体积，减压回收乙醇，水浴蒸干，真空常温干燥，分别得到提取物15、16、17、18。

本发明的三级提取物具体制备方法如下：

取提取物5(10.0g)上聚酰胺柱(柱体积900ml，约280g，聚酰胺预处理)，依次用水、30％乙醇、60％乙醇、100％乙醇分别洗3个柱体积，减压回收乙醇，水浴蒸干，真空常温干燥，分别得到提取物11、12、13、14。

因此本发明的提取物包括，提取物2，提取物3，提取物4，提取物5，提取物15，提取物16，提取物17，提取物18，提取物11，提取物12，提取物13，提取物14。

以上本发明的提取物经过试验证明具有优良的抗肿瘤活性，