[发明专利]一种扩增嗜肺军团菌gyrB基因特异区的引物及其应用

权利要求书

1.一种扩增嗜肺军团菌gyrB基因特异区的引物，其特征在于

a)该引物具有SEQ ID NO：2-SEQ ID NO：3所示的核苷酸序列或者其互补核苷酸序列；

b)上述a)中缺失、替换或插入一个或多个碱基，仍具有所述核苷酸功能的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述的引物，其特征在于所述嗜肺军团菌gyrB基因特异区具有SEQ ID NO：4所示的核苷酸序列或者其互补核苷酸序列。

3.一种权利要求1所述的扩增嗜肺军团菌gyrB基因特异区的引物的制备方法，其特征在于包括下述步骤：

1)基因组的提取；

2)通过PCR扩增嗜肺军团菌中的gyrB基因；

3)构建gyrB基因的克隆；

4)gyrB基因克隆的测序；

5)核苷酸序列的拼接及分析；

6)特异引物的筛选。

4.权利要求1所述的扩增嗜肺军团菌gyrB基因的引物在制备PCR试剂盒中的应用。

5.一种用于检测嗜肺军团菌的PCR试剂盒，其特征在于包括权利要求1所述的扩增嗜肺军团菌gyrB基因特异区的引物。

6.根据权利要求5所述的PCR试剂盒，其特征在于还包括dNTP、缓冲液和DNA聚合酶。

7.权利要求5所述的PCR试剂盒在检测嗜肺军团菌中的应用。

8.一种利用权利要求5-7中任一项所述的PCR试剂盒检测嗜肺军团菌的PCR检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)提取待测样品的DNA模板；

2)在PCR管中加入dNTP、MgCl₂、10×酶特异性反应缓冲液、Taq聚合酶、引物、待测样品DNA模板和ddH₂O，混匀；

3)将步骤2)中混匀的PCR管在PCR仪上扩增；

4)在电泳设备中电泳扩增产物，记录结果；

5)分析并进行结果判断。