[发明专利]尖锐湿疣抗体唾液快速检测试纸条

说明书

技术领域

本发明涉及快速诊断技术领域，尤其涉及一种尖锐湿疣抗体唾液快速检测试纸条。

背景技术

尖锐湿疣(CA)又称尖锐疣，或称性病疣，是由人类乳头瘤病毒(HPV)感染人体所引起的表皮肿瘤样增生，与性接触传染密切相关的疾病。据了解，近年来在我国发病率剧增，仅次于淋病。尖锐湿疣又称尖圭湿疣、尖锐疣等。是由人类瘤病毒(HPV)感染引起的一种性传播疾病。HPV有多种类型，引起本病的主要类型为HPV1、2、6、11、16、18、31、33及35型等，其中HPV16和18型长期感染可能与癌变的发生有关。

尖锐湿疣属于中医所谓“千日疮”范畴。古时称为“臊瘊”。中医书籍对本病曾有记载，《灵枢·经脉》篇有“疣目”、“千日疮”、“枯筋箭”之称。而祖国医学对发生在肛门及生殖器部位者鲜于记载。生于两阴皮肤粘膜交接处的疣由于湿润、柔软，形如菜花，污秽而色灰，故民间有“菜花疮”之称。现代中医则予以定名，赵炳南名之曰“瘙瘊”，俗称“臊瘊”。

潜伏期5周到5个月，平均2个月，多见于性活跃的青、中年男女，发病高峰年龄为20-25岁，病程平均在3-5个月的男女患者，在性接触后不久即发病，而病程平均12个月的男性患者，其性接触者可不发病。多数患者一般无症状。

目前，检测尖锐湿疣最常用的方法是采用免疫检测，该方法以抗原-抗体特意性结合为基础，包括传统的酶联免疫吸附试验(ELISA)和近来兴起的胶体金法两种。胶体金法又分为免疫层析和免疫渗滤两种方式，其中以免疫层析法最为方便、快捷。

免疫层析胶体金技术是新型的诊断技术，已得到较为广泛的应用，基本原理如下：利用胶体金标记一种抗原或抗体，在试纸条的硝酸纤维素膜上包被相应的配对抗原或抗体，检测时当样品中含有相应的特异性抗体或抗原时，胶体金标记颗粒和样品中配体相结合形成复合物，然后在硝酸纤维素膜上层析，再被包被的抗原或抗体捕获，形成肉眼可见的检测线(T线)，通过检测线的有无实现对结果的判定。但现在所使用的免疫层析检测均是以血液为样本，血液成分相对复杂，在检测前均需要进行相应的预处理，导致检测成本较高，不适合自检。

发明内容

本发明提供了一种尖锐湿疣抗体唾液快速检测试纸条，该试纸条以唾液为样品，解决了现有试纸条检测成本较高，不适合现场检测和自检的问题。

一种尖锐湿疣抗体唾液快速检测试纸条，包括底板，底板上依次粘贴有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸样垫，所述的胶体金垫上附着有胶体金标记的可与尖锐湿疣抗体特异性结合的鼠抗人IgG抗体，所述的硝酸纤维素膜上包被有由尖锐湿疣抗原构成的检测线以及由可与所述的鼠抗人IgG抗体特异性结合的羊抗鼠二抗抗体构成的质控线。

尖锐湿疣主要是由VI型、XI型HPV病毒感染所引起，所述的尖锐湿疣抗体是由VI型、XI型HPV病毒感染所产生的抗体，是临床诊断尖锐湿疣的标志物。该标记物大量存在于人体血液中，唾液中也有少量存在。所述的尖锐湿疣抗原是人重组VI型、XI型HPV病毒混合抗原，具有两个抗原决定簇，可与两种尖锐湿疣抗体同时结合。所述的鼠抗人IgG抗体、尖锐湿疣抗原以及羊抗鼠二抗抗体是均市售产品，也可通过现有方法制备获得。

所述的胶体金垫上附着有0.21～0.37μg/cm²可与尖锐湿疣抗体特异性结合的鼠抗人IgG抗体，满足试纸条检测的灵敏度要求。

所述的胶体金垫制备方法如下：

取胶体直径为15～35nm的胶体金溶液，调节pH值至8.0～8.2，以每100ml胶体金溶液计，加入0.85～1.5mg可与尖锐湿疣抗体特异性结合的鼠抗人IgG抗体，搅拌后用牛血清蛋白封闭，离心去上清液，加入相同体积的胶体金溶液复溶，将每毫升溶液均匀铺在20～40cm²玻璃纤维膜上，干燥后制得胶体金垫。

所述的检测线中尖锐湿疣抗原的含量为0.1～1.5μg/cm；所述的质控线中可与所述的鼠抗人IgG抗体特异性结合的羊抗鼠二抗抗体含量为0.1～1.5μg/cm，满足试纸条检测的灵敏度要求。

所述的检测线包被方法如下：

将所述的尖锐湿疣抗原溶解在磷酸缓冲溶液中制得浓度为0.1～1.0mg/ml溶液，用该溶液以1～1.5μl/cm的用量在硝酸纤维素膜的一端划线，干燥后即得检测线；

所述的质控线包被方法如下：