[发明专利]一种不依赖抗体检测血小板因子-4的方法无效
| 申请号： | 200910152787.2 | 申请日： | 2009-10-15 |
| 公开（公告）号： | CN101696953A | 公开（公告）日： | 2010-04-21 |
| 发明（设计）人： | 郑智国;毛伟敏;邓海腾;凌志强;牟瀚舟 | 申请（专利权）人： | 浙江省肿瘤医院 |
| 主分类号： | G01N27/64 | 分类号： | G01N27/64;G01N1/28;G01N1/38 |
| 代理公司： | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人： | 林怀禹 |
| 地址： | 310022 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 不依赖 抗体 检测 血小板 因子 方法 | ||
1.一种不依赖抗体检测血小板因子-4的方法，其特征是包括以下步骤：
(1)将标记有-NH2或-COOH功能基团的磁珠分装到聚合酶链式反应管中，然后将该聚合酶链式反应管置于磁性处理器上，移除聚合酶链式反应管内的液体；
(2)将聚合酶链式反应管从磁性处理器中取出，往聚合酶链式反应管里加入缓冲液并混合均匀；再将聚合酶链式反应管置于磁性处理器上，移除聚合酶链式反应管内的缓冲液；
(3)将聚合酶链式反应管从磁性处理器中取出，向聚合酶链式反应管中加入血清或血浆样品，混合均匀后静置；
(4)将聚合酶链式反应管置于磁性处理器上，移除聚合酶链式反应管内的液体；
(5)将聚合酶链式反应管从磁性处理器中取出，往聚合酶链式反应管里加入缓冲液并混合均匀；再将聚合酶链式反应管置于磁性处理器上，移除聚合酶链式反应管内的缓冲液；
(6)将聚合酶链式反应管从磁性处理器中取出，往聚合酶链式反应管里加入洗脱液，混合均匀后静置；
(7)将聚合酶链式反应管置于磁性处理器上，吸取聚合酶链式反应管内的液体；
(8)将所吸取的液体与饱和芥子酸溶液混合均匀，吸取该混合液到基质辅助激光解析电离质谱的靶上，待靶上的溶液结晶后将该靶放入质谱仪中进行检测。
2.根据权利要求1所述的一种不依赖抗体检测血小板因子-4的方法，其特征是：所述洗脱液包括体积百分比为50％的乙腈和体积百分比为0.5％的三氟乙酸。
3.根据权利要求1所述的一种不依赖抗体检测血小板因子-4的方法，其特征是：所述洗脱液为0.1摩尔/升的氨基乙酸或者为体积百分比为1％的三氟乙酸。
4.根据权利要求1所述的一种不依赖抗体检测血小板因子-4的方法，其特征是：所述磁珠的直径为50nm～1um。
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