[发明专利]一种水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法

权利要求书

1、一种水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)菌种准备：将水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)用PDA培养基活化培养2-5天，获得菌丝；

(2)接种体的准备：在步骤(1)活化培养后的菌落边缘，划取1mm×1mm菌丝块接种至装有PDB培养基的烧瓶中，黑暗、28℃，130-140rpm振荡培养7-10天至产生菌丝球；接种菌丝球前将菌丝球用40目双层尼龙网过滤并用无菌水冲洗2次后，待用；

(3)将待鉴定的水稻品种或品系的种子在培养皿中于湿润滤纸上、30℃下催芽后播种于育秧盘中，每品种均匀播种1行，每行15株苗，每盘10行；每品种播3次重复；播种后育秧盘放置水槽中，水槽中保水深度为2cm，根据温度，温室或露天放置，待苗长至3-4叶期，待用；

(4)接种：将步骤(2)过滤后的菌丝球用镊子夹取放置于2cm×2cm的锡箔纸上，贴包至步骤(3)获得的水稻苗近基部，使菌丝球与稻茎接触，每行选择10株接种；接种后秧盘移至水槽内，并罩上透明密闭的聚酯玻璃箱内保湿度大于80％，环境温度28℃；待病斑扩展至锡箔纸外时，将锡箔纸及菌丝球取下；幼苗正常生长管理；

(5)在接种7-10天后或感病对照品种Loment发病至9级，对苗期单株水稻材料进行纹枯病病害等级鉴定；

(6)根据病害评价等级计算病情指数，确定水稻品种或品系苗期纹枯病的抗性。

2、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：将待鉴定的水稻品种或品系的种子按步骤(3)～(6)至少再进行1次重复鉴定，将分次鉴定的病情指数的平均值作为该水稻品种或品系的最终鉴定的病情指数。

3、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：步骤(1)中将水稻纹枯病菌(Rhizoctonia solani)用PDA培养基活化培养3天。

4、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：步骤(2)中菌丝块接种至装有PDB培养基，是每毫升PDB培养基接种一块菌丝块，PDB培养基体积为烧瓶总体积的1/3-1/2。

5、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：步骤(2)中的接种是取50-100个菌丝块至装有150mlPDB培养基的250ml烧瓶中。

6、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：步骤(3)中的育秧盘是56cm×21cm×4cm的育秧盘。

7、根据权利要求1所述的水稻纹枯病抗性苗期鉴定的方法，其特征在于：步骤(3)中在环境温度小于20℃时温室放置，在环境温度高于20℃-35℃时露天放置。