[发明专利]一种海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法

权利要求书

1.一种海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，其特征在于包括以下步骤：

1)海捕虾酚氧化酶的制备：将原料虾搅匀制浆，称取一定质量的虾浆，按照料液比1∶1～1∶3加入pH值7-9的tris-HCl缓冲溶液，采用震荡仪震荡均匀，2～10℃下静置4～15分钟后，利用高速冷冻离心机以转速8000-10000r/min离心10-30分钟，上清液即为粗PPO酶液；

2)取试管1和试管2，依次向试管1中加入pH值7-9的Tris-HCl缓冲液2～4ml和0.004～0.05mol/LL-DOPA溶液1.5～2.5ml，向试管2中加入0.8～1.2ml PPO酶液，将两只试管在40-45℃水浴中放置10-20min，立即混匀；

3)将混合液在460-520nm波长下进行比色测定，每10～50秒记录一次OD值随时间的变化，测定6-10min，以最初直线段的斜率计算酶活力。

2.根据权利要求1所述的海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，其特征在于步骤2)中Tris-HCl缓冲液的加入量优选3ml，L-DOPA加入量优选2ml，PPO酶液量优选1ml。

3.根据权利要求1所述的海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，其特征在于比色测定的波长优选为490nm。

4.根据权利要求1或2或3所述的海捕虾中多酚氧化酶活性状态的检测方法，其特征在于粗PPO酶液采用凝胶过滤和离子交换等手段进行再次提纯即为提纯后的PPO酶液，再去水浴。