[发明专利]一种破酵母细胞细胞壁的方法无效
申请号: | 200910154651.5 | 申请日: | 2009-11-23 |
公开(公告)号: | CN102071151A | 公开(公告)日: | 2011-05-25 |
发明(设计)人: | 吴菁;史利斌 | 申请(专利权)人: | 湖州来色生物基因工程有限公司 |
主分类号: | C12N1/16 | 分类号: | C12N1/16;C12N1/18;C12N1/06;C12R1/865 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 313100 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 酵母 细胞 细胞壁 方法 | ||
1.一种破酵母细胞细胞壁的方法,其特征包括以下几个步骤:
(1)酵母细胞预处理
废酵母细胞用无菌水稀释,所得溶液用70目分子筛筛分二次,再用90目分子筛筛分二次,将所得溶液离心分离10min,得到纯净的酵母细胞。
(2)利用碱法初步破碎酵母葡聚糖层
配制酵母、氨混合菌悬液,其中酵母浓度为10%,氨浓度为1%,将菌悬液放入60℃恒温水槽中水浴加热30min。所得溶液离心分离(3600n/min)10min,得到酵母沉淀。
(3)利用变温法与盐法结合二次破碎酵母细胞壁
所得酵母沉淀再用10倍无菌水稀释,用HCl调节PH至6.5,速冻至零下20℃,冷冻20min,然后用微波炉微波解冻,再100ml水加2.5克NaCl往溶液中加一定量的食盐,将混合液放入70℃恒温水槽中,加热2.5h,重复以上步骤3次。
2.如权利(1)所述的酵母细胞预处理过程,其特征在于所用的酵母菌为啤酒废酵母。
3.如权利(2)所述的酵母细胞破壁方法,其特征在于所用的酵母细胞为纯净的酵母细胞。
4.如权利(3)所述的酵母细胞破碎方法,其特征在于变温的温差为90℃时酵母细胞破碎率最高。
5.如权利(3)所述的酵母细胞破碎方法,其特征在于在酵母浓度10%时NaCl的加入量为2.5%时酵母细胞破碎率最高。
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