[发明专利]一种猕猴桃根多糖提取物的制备方法

说明书

(一)技术领域

本发明涉及一种猕猴桃根多糖提取物(包括猕猴桃根粗多糖与猕猴桃 根精制多糖)的制备方法。

(二)背景技术

猕猴桃根(Radix Actinidia Chinensis)，为中华猕猴桃(Actindia chinensis Planch)的根，又名藤梨根，收载于《中国药典》(1977年版)， 具有清热、利尿、活血、消肿等作用，临床上主要用于治疗胃肠道肿瘤及 乳腺癌，疮疖，瘰疬结核，肝炎等。

现代药理研究发现猕猴桃根中的多糖成分-中华猕猴桃根多糖 (Actindia Chinensis Planch Polysaccharide，ACPS)具有抗肿瘤、增强免 疫机能、消除活性氧自由基等作用，且无副作用。近年来，对于猕猴桃根 多糖的药理研究已有文献报道，阎家麒等发现中华猕猴桃根提取物对超氧 自由基的去除能力与SOD相同，对氢自由基的去除能力比VC略强。张 菊明、林佩芳等研究表明猕猴桃根多糖复合物可以抑制小鼠肿瘤的增长以 及增强细胞天然杀伤功能，并且对于宿主具有保护作用，机体特异抗菌抗 体的水平，激活巨噬细胞的吞噬功能。目前，猕猴桃根多糖提取物的制备 主要采用以下两种方法：

方法1：猕猴桃根药材加20倍的水加热提取，每次0.5h，提取2次， 水提液加入乙醇使含醇量达80％(v/v)，静置过夜，抽滤，得沉淀。这种 方法制备的猕猴桃根多糖提取物提取率低，纯度低，药效活性低，颜色深、 质量差，能耗大，成本高。

方法2：是本专利发明人申请(并授权)的专利，专利公告号CN 1067258C，具体方法：猕猴桃根药材加2～8倍量20～50％(v/v)的乙 醇浸渍1～3次，每次18～30小时，静置，取上清液，合并，加乙醇调至 含乙醇量为60～95％(v/v)，静置24小时，离心，沉淀物再加2～7倍量 50～80％乙醇(v/v)、无水乙醇各洗一次，弃去洗液，沉淀物再加2～4 倍量乙醚洗涤一次，弃去乙醚液，沉淀物室温减压干燥。它的缺点是猕猴 桃根多糖提取率、纯度与药效活性较低，能耗大，操作繁琐，耗时长，成 本高，而且由于使用了乙醚，增加了安全隐患。

(三)发明内容

本发明目的是提供一种工艺简便，提取率高，纯度高，药效活性高， 能耗小、成本低的猕猴桃根多糖提取物的制备方法。

本发明采用的技术方案是：

一种猕猴桃根多糖提取物的制备方法，所述的方法包括：

取干燥猕猴桃根(Radix Actinidia Chinensis)(含饮片)以水加热回流 提取，提取液高速离心(转速5000～25000r/min，时间5～30min)除去不 溶物，上清液先用截留分子量为3000000Da的膜超滤除去蛋白质等大分 子物质；超滤液再用截留分子量为5000Da的膜超滤除去无机盐、氨基酸、 小分子色素等小分子杂质，同时除去滤液中的部分水份，浓缩至所得浓缩 液中药材含量为0.1～5g/mL，浓缩液加入乙醇至乙醇浓度为50～90％(v/v)， 静置醇沉，离心，取沉淀洗涤后干燥，即得所述猕猴桃根(粗)多糖。

猕猴桃根粗多糖，还可进一步采用以下纯化步骤：

(1)取猕猴桃根粗多糖，每g加蒸馏水50～200ml配制成水溶液， 水溶液采用聚酰胺或活性炭或硅藻土等脱色剂脱色，过滤，取 滤液进行下一步纯化操作；

(2)步骤(1)滤液上大孔吸附树脂柱(可除去蛋白质，多肽，核酸 等杂质)或DEAE纤维素柱(可除去多糖中的蛋白质，多肽， 核酸等杂质)，以NaCl溶液洗脱，洗脱液采用截留分子量为 1000～5000Da的超滤膜洗滤1～3次，除盐并浓缩，得浓缩液；

(3)浓缩液干燥即得猕猴桃根多糖。

上述步骤(2)中的大孔吸附树脂柱和DEAE纤维素柱纯化技术可以 单独使用，也可以两项联用，即步骤(2)可重复进行，通常先用大孔吸 附树脂纯化，再用DEAE纤维素柱纯化。

以上所述大孔吸附树脂的型号可以是AB-8型，MG-1型，LSA-5B 型，X-5型，H107型，S-8型，D900型，HPSIP1300型，SIP1400型， NKA-9型，DM130型或D3520型等，所述DEAE纤维素可以是DEAE-32 或DEAE-52。

具体的，优选的，所述的方法按如下步骤进行：