[发明专利]蛋白激酶PFTK1单克隆抗体及其制备方法

权利要求书

1.一种PFTK1蛋白激酶的多肽，其特征在于包含SPSSPTSPKFGKADSYEKLEKL的保留序列。

2.一种PFTK1免疫抗原，其特征在于是由如权利要求1所述半抗原与KLH偶联得到的。

3.一种PFTK1检测抗原，其特征在于是由如权利要求1所述半抗原与BSA偶联得到的。

4.一种能稳定分泌抗PFTK1的单克隆抗体的杂交瘤细胞4E7，保藏号3140，其是由权利要求1所述半抗原制备得到的。

5.一种鼠源性抗PFKT1单克隆抗体，其是由权利要求2所述免疫抗原制备得到的。

6.一种如权利要求5所述单克隆抗体的制备方法，其包括如下步骤：

1)制备免疫原：将权利要求1所述半抗原分别与KLH和BSA偶联，以KLH-P做免疫抗原，以BSA-P做检测抗原；

2)免疫：采用常规方法，初次免疫用弗氏完全佐剂与免疫抗原以等比例混合乳化，皮下和腹腔混合方式免疫BALB/c小鼠；之后以不完全佐剂与免疫抗原乳化，腹腔注射小鼠，免疫剂量与初次免疫相同，融合前，腹腔注射无佐剂抗原；

3)筛选：用酶联免疫吸附法筛选免疫鼠血清；

4)细胞融合、筛选及克隆化：选抗血清效价最高的鼠取脾细胞与骨髓瘤细胞体外融合，经亚克隆获得稳定分泌抗PFTK1的单克隆抗体细胞株；

5)单克隆抗体的提取与纯化：采用体外制备腹水法，提取单克隆抗体，将克隆化的细胞株体外扩大培养后，打入经产小鼠腹腔，产生大量腹水，采用优球蛋白沉淀法纯化单克隆抗体。

7.一种蛋白激酶PFTK1的免疫检测试剂盒，其含有如权利要求5所述的鼠源性抗PFKT1单克隆抗体的。