[发明专利]一种适用于组织培养基的低酰基结冷胶提取方法有效
申请号: | 200910158365.6 | 申请日: | 2009-07-09 |
公开(公告)号: | CN101591399A | 公开(公告)日: | 2009-12-02 |
发明(设计)人: | 吴炳华;朱正学;王雪刚;王佳良;包圣强;沈孝琴 | 申请(专利权)人: | 浙江中肯生物科技有限公司 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;C12S3/02 |
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地址: | 314515*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 适用于 组织 培养基 低酰基结冷胶 提取 方法 | ||
1.一种适用于组织培养基的低酰基结冷胶的后提取方法,其包括步骤:
(1)发酵液的脱酰基处理:
将发酵液温度升至80~90℃,加入抗氧化剂,同时加入碱调节pH值 至9.5至11,缓慢搅拌10~15分钟,然后加入酸,调节pH值至中性,降温 40℃以下;
(2)发酵液的酶处理:
在步骤(1)发酵液中依次加入不同浓度已经用少量水溶解分散的纤 维素酶、溶菌酶和蛋白酶,并分别维持不同时间,所述蛋白酶为中性蛋白 酶或碱性蛋白酶;
(3)发酵液的絮凝:
在步骤(2)酶处理后的发酵液中,加入镁、钙、钡、锌、铝的水溶 性盐或其组合絮凝,再调节pH值至碱性,固液分离,以除去发酵液中大部 分水以及色素,得到结冷胶粗品;
(4)结冷胶澄清处理:
将步骤(3)得到的结冷胶粗品通过澄清处理,得到澄清的低酰基结 冷胶溶液;
(5)脱酰基结冷胶溶液脱水处理:
在步骤(4)得到的结冷胶脱酰基澄清溶液中,通过加入氯化钾、氯 化钠、硫酸钾、硫酸钠、氯化钙、氯化镁或氯化铁形成凝胶,固液分离;
(6)离子交换及脱色处理:
将步骤(5)得到的结冷胶切碎成细小颗粒,通过离子交换工艺将结 冷胶中的二价阳离子大部分祛除;稍微压干后的结冷胶再用低级醇浸泡并 搅拌、过滤以达到彻底脱色效果,其中所述低级醇为乙醇、异丙醇、正丁 醇中的一种或多种;
(7)配入适当质量的螯合剂/酸体系:
在步骤(6)得到的结冷胶中加入适当质量的螯合剂/酸体系以螯合在 结冷胶使用过程中可能额外加入的二价阳离子同时保持pH值的相对稳定, 搅拌均匀;
(8)干燥粉碎:
将步骤(7)中获得的结冷胶固体物料干燥并粉碎,得到高透明度低 酰基清型结冷胶产品。
2.权利要求1的方法,其中步骤(1)中加入的抗氧化剂为抗坏血酸、异 VC钠、焦亚硫酸钠、焦亚硫酸钾、硫酸氢钾、半胱氨酸中的一种或多种, 浓度为100~300ppm。
3.权利要求2的方法,其中抗氧化剂的浓度为150~250ppm。
4.权利要求1的方法,其中步骤(1)加入的用于调整pH的碱为NaOH、 KOH、Na2CO3、K2CO3中的一种或多种。
5.权利要求4的方法,其中步骤(1)加入的用于调整pH的碱为NaOH, KOH中的一种或多种。
6.权利要求4或5的方法,其中步骤(1)加入的用于调整pH的碱为NaOH。
7.权利要求1的方法,其中步骤(1)中使用碱将pH值调节到10。
8.权利要求1的方法,其中步骤(1)中,调整pH的碱应先配成浓度为 10%的溶液。
9.权利要求1的方法,其中步骤(1)中,保持温度在85~90℃之间。
10.权利要求9的方法,其中步骤(1)中,保持温度在86~88℃之间。
11.权利要求1的方法,其中步骤(1)中,调整pH的酸为无机酸或有机 酸。
12.权利要求11的方法,其中步骤(1)中,调整pH的酸为无机酸。
13.权利要求11或12的方法,其中无机酸为盐酸、硫酸、磷酸中的一种 或多种。
14.权利要求13的方法,其中无机酸为盐酸。
15.权利要求11的方法,其中有机酸为甲酸、醋酸、柠檬酸、苹果酸、酒 石酸中的一种或多种。
16.权利要求1的方法,其中步骤(1)中,调整pH的酸的用量能将发酵 液体系pH调节到7。
17.权利要求1的方法,其中步骤(1)中,调整pH的酸先配成浓度为10% 的溶液。
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