[发明专利]乙型脑炎病毒PrM/M蛋白B细胞抗原表位多肽及应用

说明书

技术领域

本发明涉及抗原表位多肽，尤其涉及乙型脑炎病毒PrM/M蛋白B 细胞抗原表位多肽，本发明还涉及该抗原表位多肽在诊断乙型脑炎病毒 中的应用，属于分子免疫学领域。

背景技术

流行性乙型脑炎乙型脑炎是由乙型脑炎病毒(Japanese Encephalitis virus，JEV)引起的一种重要蚊媒性人兽共患传染病。该病毒首先于1953 年在日本从患者脑组织中分离获得，因此称日本脑炎病毒，所致疾病在 日本称日本乙型脑炎。在我国最早于1940年分离此病毒，为了与甲型 脑炎相区别，定名为流行性乙型脑炎，简称乙脑。在世界范围内每年有 30,000-50,000例乙脑病例，约25％-30％死亡，50％导致永久性中枢神 经系统后遗症。我国近年每年的乙脑病例大于5000例，死亡200例以 上。对于流行性乙型脑炎病毒多种动物易感，但除人、马和猪外通常不 呈现临床症状。对人主要引起中枢神经系统的急性感染，人感染临床上 以高热、意识障碍、抽搐、呼吸衰竭及脑膜刺激征为特征。母猪感染可 引起流产、产死胎或木乃伊胎，公猪感染导致睾丸肿大影响繁殖性能为 特征，少数猪只感染可能呈现发热和神经症状，而其他猪则大多数不呈 显症状。给养猪业造成巨大的经济损失。马属动物易感染，少数引起脑 炎与神经症状，马是终末宿主。蚊是JEV的主要传播媒介，猪是该病 毒在自然界中最重要的贮存与增殖宿主。乙型脑炎病毒主要在亚洲流 行，而最近发现在南半球也有报道，这说明流行性乙型脑炎可能在世界 范围内威胁着人类健康。

乙型脑炎病毒属黄病毒科，黄病毒属，为单链正链RNA病毒。基 因组约11kb，包含一个大的开放阅读框架(ORF)，两端是5’端和3’ 端非编码区(UTR)。基因组5’端有帽子结构，但在3’端没有poly(A) 尾。ORF编码含3432个氨基酸的前体蛋白，在病毒和宿主细胞蛋白酶 的作用下加工为10个成熟蛋白，包含3个结构蛋白(C，PrM/M，E)， 7个非结构蛋白(NS1，NS2A，NS2B，NS3，NS4A，NS4B，NS5)。 病毒粒子呈球形，直径约30nm，有囊膜。JEV只有一个血清型，在抗 原性上与西罗病毒、墨罗河谷脑炎病毒、圣路易脑炎病毒等属同一血清 群，存在抗原交叉反应。E蛋白是乙型脑炎病毒的主要结构蛋白，在诱 导机体免疫及病毒感染细胞过程中都起着重要的作用，也是基因工程疫 苗和诊断试剂研究最常用的靶蛋白。但也是E蛋白在黄病毒科不同病 毒间和血清学交叉反应最大。因此以E蛋白为靶蛋白进行的血清学诊 断不能对不同黄病毒感染进行鉴别诊断。研究表明黄病毒科中乙型脑炎 病毒，西尼罗病毒，登革热病毒的PrM/M蛋白在血清学上不存在交叉 反应。所以将乙型脑炎病毒PrM/M蛋白作为血清学诊断检测的靶蛋白 具有更好的特异性(Cardose M J，Wang S M，Sum M S，et al.Antibodies against prM protein distinguish between previous infection with dengue and Japanese encephalitis viruses.BMC Microbiology，2002，2：9)。