[发明专利]酸性果胶酶液体制剂的生产方法有效
申请号: | 200910160785.8 | 申请日: | 2009-07-10 |
公开(公告)号: | CN101684462B | 公开(公告)日: | 2010-03-31 |
发明(设计)人: | 刘鲁民;范志恒;陈亮珍;于瑞凤;杨晓英;陈刚;黄炳亮;彭虹旎;刘安邦;李红军 | 申请(专利权)人: | 山东康地恩生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N9/96 | 分类号: | C12N9/96;C12N9/26;C12R1/685 |
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地址: | 273400 山东省临沂市费县*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 酸性 果胶酶 液体 制剂 生产 方法 | ||
1.一种酸性果胶酶液体制剂的生产方法,其特征是按下述工艺步骤进行:
1)、斜面菌种的制备:以黑曲霉(Aspergillus niger)为菌种,用麸皮、琼脂、苹果渣按重量比20∶2∶1的比例制成斜面培养基,121℃高压灭菌30min,冷却后划线接种于30℃恒温培养72h;
2)、摇瓶菌种的制备:按麸皮100g、硫酸铵2g、葡萄糖1g、水200ml的配比配料,装入3L三角瓶中,121℃高压灭菌30min,冷却后接种,接种重量比为1%~5%,30℃恒温培养48h;
3)、发酵制备熟曲:按麸皮100、苹果渣20、葵盘粉20、硫酸铵2、葡萄糖1和水300的重量配比称好原料,混合拌匀后,121℃灭菌1h,冷却后接种摇瓶菌种,接种重量比为3%,控制发酵室温度为28~32℃,湿度80~100%,发酵84~96h,即得熟曲;
4)、浸提:以0.02mol的磷酸氢二钠溶液与0.01mol的柠檬酸溶液配制成pH为3.8的浸提液,熟曲与浸提液按1∶3的重量比混合拌匀,浸提30min;
5)、固液分离:浸提后经压榨得混汁,在混汁中加入重量比为1%的氧化铝,再经板框过滤得清汁;
6)、去渣澄清:清汁经超滤膜微滤;
7)、乙醇沉淀:将微滤后的清汁,在搅拌的状态下按80%的重量比加入体积比为95%的乙醇,静置沉淀10h;
8)、固液分离:将步骤7)的沉淀物压滤,除去乙醇,制得固态果胶酶;
9)、复溶:将固态果胶酶加入溶剂中进行复溶,即得酸性果胶酶液体酶制剂;所述溶剂由甘油、山梨醇、聚乙二醇和山梨酸钾组成,与固态果胶酶的重量比分别为:20%、12%、0.5%和0.1%。
2.根据权利要求1所述的酸性果胶酶液体制剂的生产方法,其特征是所述溶剂由甘油、山梨醇和聚乙二醇组成,与固态果胶酶的重量比分别为:25%、12%和0.5%,复溶时,用盐酸在快速搅拌的状态下调整pH至3.8。
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