[发明专利]一种繁殖铁皮石斛试管苗的方法有效
| 申请号： | 200910164340.7 | 申请日： | 2009-09-03 |
| 公开（公告）号： | CN101810140A | 公开（公告）日： | 2010-08-25 |
| 发明（设计）人： | 淳泽;何涛;刘静;许轲;汪天杰;韩瑜 | 申请（专利权）人： | 四川万安石斛产业开发有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人： | 李高峡 |
| 地址： | 610200*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 繁殖 铁皮 石斛 试管 方法 | ||
1.一种繁殖铁皮石斛试管苗的方法，其特征在于：它包括如下步骤：
a、选择铁皮石斛茎段或茎段腋芽为外植体，检测其茎段或茎段腋芽的叶绿体具有GenBank的登录号为：FJ530946的基因序列，如SEQ ID NO：1所示的外植体备用；
b、腋芽成活生长，丛生芽的诱导与增殖，成苗；其中，培养条件是：培养室温度（26±2）℃，光照强度2000 lx，pH 5.8-6.0，光源为LED光源，每天光照12 h；
所述检测外植体的方法如下：
1）提取外植体DNA；
2）用序列如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的引物，对1）提取的DNA进行PCR扩增，
SEQ ID NO：2：5‘-CCTATATCCGCTACTCCTTC-3’，
SEQ ID NO：3：5’-CTCAGTGAATTTCACCACG-3’，
3）将SEQ ID NO：1基因序列作为阳性对照；
4）检测扩增产物，判断是否含有SEQ ID NO：1所示序列；
所述的腋芽成活生长培养基为：1/2MS＋NAA 0.2 mg/L＋BA 1 mg/L；
所述的丛生芽的诱导与增殖培养基为：1/2MS﹢NAA 0.5 mg/L﹢BA 2.0 mg/L ﹢香蕉汁100 g/L或者1/2MS﹢NAA 0.5 mg/L﹢BA 2.0 mg/L ﹢马铃薯汁200 g/L。
所述的LED光源中红光和蓝光的比例为6-9︰1-4。
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