[发明专利]苔藓植物作为植物外植体消毒剂的用途、及该消毒剂组合物及其制备方法和使用方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组培技术的消毒，具体涉及将苔藓植物用于植物外植体消 毒剂的新用途，及该消毒剂组合物及其制备方法和使用方法。

背景技术

植物组织培养中的污染主要是由外植体带菌、接种操作污染、培养室污染 等原因造成；后两者可以通过熟练操作过程和提高培养室洁净度而避免，而外 植体带菌就需要选择适合的消毒方式，严格消毒处理，再经无菌操作接种到无 菌培养基上。依据传统的表面灭菌处理技术，采来的外植体除去不用的部分之 后，还需对其进行以下几个步骤的处理：(1)外植体表面灭菌从室外带回来的 材料，要除去一些不必要的部分，洗去泥土，然后用洗洁剂浸泡、冲洗，必要 时可用软刷刷洗或用脱脂棉球擦洗材料表面，然后剪成适宜的大小，通过表面 灭菌可清除许多杂菌。(2)植物材料浸入70％的酒精处理。(3)用消毒剂处理， 常用的表面灭菌剂有酒精、升汞、双氧水以及次氯化物。(4)无菌水漂洗。外 植体的彻底消毒是组织培养成功的关键因素之一。外植体消毒剂的选择上应该 既考虑到有效减少或阻止植物组织培养基的微生物污染，又要兼顾植物组织正 常生长或发育。

中国专利CN1561695A公开了一种植物组培消毒方法，采用次氯酸钠和氯化 汞作为植物材料消毒剂，但是，氯化汞是剧毒物质，污染环境、消毒后难以除 去残余汞对外植体的杀伤作用；次氯酸盐对组织也有毒害作用。实践中出现的问 题是，消毒时间长了植物材料死亡，消毒时间短了植物材料表面细菌不能杀死， 致使植物材料污染死亡。中国专利CN101461329A公开了一种外植体的表面灭菌 方法，采用的次氯酸钠、氯化汞、溴水作为消毒剂，但这种消毒剂对于具有内 生菌的植物材料消毒效果较差，其蝴蝶兰组培的污染率多达50％，红掌组培的污 染率更高达65％。中国专利CN101138317A公开了组织内带菌外植体消毒的处理方 法，外植体消毒仍然采用常规的酒精浸泡和次氯酸钠消毒，在组织培养基中加 入羧苄青霉素、硫酸链霉素和制菌霉素，防治组培污染，但是它不是针对植物 外植体本身消毒，而是针对组培培养基，而且，抗生素会造成植物毒害或改变 培养植物的行为。中国专利CN1871889A公开了一种植物内生菌脱除方法，在采 集植物组织之前对植株进行农药连续喷施三次后，开始采外植体进行组培，操 作不便且对于随机采集珍贵物种组培不适合，亦难以推广。

苔藓植物是一群小型的多细胞高等植物，多适生于阴湿的环境中，不被细 菌、真菌或病毒所感染，具有不易腐烂，不易霉变，不被昆虫和一些动物所侵 害等特点。存放在标本馆里的苔藓植物标本，不像其它高等植物那样易受寄生 微生物(细菌、真菌等)的侵蚀，不需经过特别处理就可以长期存放。苔藓植物 作为简单的陆生植物，形态学上防御屏障几乎没有，为适应其生存环境，发展 了所谓的“化学屏障”，即能够合成具有抗微生物活性的次生代谢产物以保护自 身，抵抗微生物的侵害。在民间，苔藓被广泛用于治疗外伤、烧伤、感染、肺 结核、烫伤和肺炎等症。苔藓具有抗病原微生物的作用，可以在阴暗、暖湿的 环境生活，免受自然界各种病菌的感染，主要原因就是苔藓内的多种抗菌活性 成分，对众多细菌、真菌、病毒同时具有抑制作用，是少有的天然来源的抗真 菌化合物，可谓一种天然的广谱抗菌物质。目前还未见有将苔藓植物用于植物 组培消毒的相关研究和报道。

发明内容

本发明要解决的是现有的用于植物组培的消毒剂杀菌效果不理想或容易使 植物本身受到毒害的技术问题，而首次将苔藓植物用作植物外植体消毒的消毒 剂，并提供这种消毒剂组合物，该组合物含有苔藓植物杀菌抑菌活性成分，用 于植物外植体消毒，降低植物组培微生物污染，具有安全无毒、杀菌性能好的 优点，本发明还提供了这种消毒剂组合物的制备方法和使用方法。

为解决上述技术问题，本发明采取的技术方案是：一种用于植物外植体的 消毒剂组合物，其特征在于，该组合物包括活性成分、渗透剂、稳定剂和助溶 剂，所述活性成分为苔藓植物，其中各组分重量比为：

苔藓植物：85-100重量份，

渗透剂：2-5重量份，

稳定剂：5-10重量份，

助溶剂：0.5-1重量份。

所述苔藓植物的重量为苔藓植物经烘干、研磨制得的干粉的重量。