[发明专利]麻疹病毒检测方法、膜层析用试验用具及其测试试剂盒

说明书

技术领域：

本发明涉及一种用可与麻疹病毒抗原结合的抗麻疹病毒单克隆抗体检测试样中麻疹病毒的麻疹病毒检测方法。本发明还涉及一种检测麻疹病毒用侧向流动式膜层析用试验用具及使用此用具的膜层析用测试试剂盒。本发明还涉及一种检测麻疹病毒用渗透式膜层析用测试试剂盒。

背景技术

麻疹病毒属于副粘病毒科麻疹病毒属，是一种直径100～250nm、具包膜的单链RNA病毒。感染麻疹病毒后，麻疹病毒首先在呼吸器官上皮细胞繁殖，然后以淋巴结、脾脏、胸腺等全身淋巴组织为中心增殖，引起淋巴细胞减少和免疫系统衰退等症状。麻疹病毒感染性极强，一旦人感染上，还可能引起二次感染，因此麻疹感染的检查极为重要。

作为检查有无感染麻疹病毒的方法已知有检查存在于被检者体内的麻疹病毒抗体的方法。比如WO93/22683中记述的一种方法是让至少含一个能用麻疹特异性免疫球蛋白IgM识别的表位的重组麻疹核蛋白质抗原与人血清试样接触，检测是否存在与上述抗原结合的麻疹特异性免疫球蛋白IgM。

此外，WO97/07400中也记述了一种检测样本中所含麻疹病毒的方法。具体而言，作为将对病毒表层蛋白质有亲和性的分子固定在微小固体载体表面的病毒凝聚检查药，记述了一种将抗麻疹病毒单克隆抗体固定在微小固体载体表面的麻疹病毒检查药。

然而，WO93/22683中记述的方法存在以下问题：即使感染麻疹病毒，到IgM的抗体价在感染者体内上升为止也要至少三天时间，因此，用上述方法无法早期发现麻疹病毒感染。不仅如此，在感染麻疹病毒到IgM的抗体价上升期间用上述方法检查的话，还可能判断为假阴性。

另一方面，采用WO97/07400中记述的方法，麻疹病毒本身存在与否虽然可以判断，但在上述方法中必须使用阳性对照和阴性对照，检查作业复杂，不能迅速判定有无麻疹病毒。

如上所述，麻疹病毒感染能力非常强，要求通过迅速、切实地检查有无麻疹病毒来早期发现麻疹病毒，采取措施预防二次感染。用WO93/22683和WO97/07400上记述的方法在迅速性和切实性上均不能提供满足上述要求的麻疹感染检查。

发明内容：

因此，本发明包括：

一种从样本中检查麻疹病毒的方法，包括：

在固相上形成包含可与麻疹病毒核蛋白质结合且固定在固相上的第一单克隆抗体、可与麻疹病毒核蛋白质结合且被标记的不同于上述第一单克隆抗体的第二单克隆抗体和样本所含的麻疹病毒核蛋白质的复合物；及根据在该固相上形成的复合物的标记数检查麻疹病毒。

所述方法，还包括：通过混合样本和含非离子表面活性剂的样本处理液来制备测定试样的步骤，其中，所述复合物形成步骤包括用已制备的所述测定试样形成复合物。

所述方法，所述样本选自包括唾液、鼻涕、鼻腔拭液、鼻腔吸取液和咽喉拭液的组群。

所述第一单克隆抗体是从包括识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第135位到241位氨基酸序列的单克隆抗体、识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第485位到525位氨基酸序列的单克隆抗体及识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第91位到134位氨基酸序列的单克隆抗体在内的单克隆抗体组群中选择一个单克隆抗体，所述第二单克隆抗体是从所述单克隆抗体组群选出的其他抗体。

所述第一单克隆抗体是识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第135位到241位氨基酸序列的单克隆抗体和识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第485位到525位氨基酸序列的单克隆抗体其中之一，

所述第二单克隆抗体是识别并结合序列号9所示麻疹病毒核蛋白第91位到134位氨基酸序列的单克隆抗体。

本发明还提供一种膜层析用试验用具，包括：

膜载体，具有固定有能与麻疹病毒核蛋白质结合的第一单克隆抗体的判断区；及

标记附着垫，用于附着能与麻疹病毒核蛋白质结合且不同于上述第一单克隆抗体的被标记第二单克隆抗体。

所述试验用具，其特中所述判断区还固定能与麻疹病毒核蛋白质结合、不同于所述第一单克隆抗体和所述第二单克隆抗体的第三单克隆抗体。

本发明再提供一种膜层析用测试试剂盒，包括：前述膜层析用试验用具；及含有非离子表面活性剂、用于与样本混合制备测定试样的样本处理液。

所述测试试剂盒，还包括可盛放上述测定试剂、可插入所述试验用具的试验容器。

本发明又提供一种膜层析用测试试剂盒，包括：

具备膜载体的试验用具，该膜载体含有固定有可与麻疹病毒核蛋白质结合的第一单克隆抗体的判断区；及