[发明专利]HLA基因扩增和基因分型方法及其相关引物有效
申请号: | 200910174203.1 | 申请日: | 2009-09-23 |
公开(公告)号: | CN101654691A | 公开(公告)日: | 2010-02-24 |
发明(设计)人: | 李剑;瞿京辉;杜金伟;王莉萍;张红云;田中明;黄常健;许婷婷;沈苗忠;杨华志;甄贺富;陈浩;潘捷;余艳华;陈演华;廖宽震;姜范波;华桑;刘丹;叶葭;高扬;杨玲 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/34 | 分类号: | C12P19/34;C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 北京北翔知识产权代理有限公司 | 代理人: | 张广育;姜建成 |
地址: | 518083广东省深圳市盐*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | hla 基因 扩增 方法 及其 相关 引物 | ||
1.一种HLA基因扩增方法,其特征在于使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-A基因。
2.权利要求1的HLA基因扩增方法,其特征在于还使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B基因,并且/或者还使用SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-C基因。
3.权利要求2的HLA基因扩增方法,其特征在于使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B基因。
4.权利要求2的HLA基因扩增方法,其特征在于使用SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-C基因。
5.权利要求2的HLA基因扩增方法,其特征在于使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4,以及SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B和HLA-C基因。
6.一种HLA基因分型方法,所述方法包括:
(1) 使用SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2的扩增引物对进行PCR扩增,扩增待测样本的HLA-A的全长基因,
(2) 使用SEQ ID NO:7至SEQ ID NO:12的测序引物对PCR产物进行扩增,扩增HLA-A的各外显子,然后对扩增出的各外显子进行测序,并将测序结果与数据库中的标准序列进行比较,从而确定基因分型结果,
所述HLA基因分型方法不用于诊断目的。
7.权利要求6的HLA基因分型方法,其中:
在所述方法的(1)中,还包括使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B基因,并且/或者使用SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-C基因;
在所述方法的(2)中,还包括使用SEQ ID NO:13至SEQ ID NO:18的测序引物对PCR产物进行扩增,扩增HLA-B的各外显子,并且/或者使用SEQ ID NO:19至SEQ ID NO:24的测序引物对PCR产物进行扩增,扩增HLA-C的各外显子,然后对扩增出的各外显子进行测序,并将测序结果与数据库中的标准序列进行比较,从而确定基因分型结果。
8.权利要求7的HLA基因分型方法,使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B基因,使用SEQ ID NO:13至SEQ ID NO:18的测序引物对PCR产物进行扩增,扩增HLA-B的各外显子,然后对扩增出的各外显子进行测序,并将测序结果与数据库中的标准序列进行比较,从而确定基因分型结果。
9.权利要求7的HLA基因分型方法,使用SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-C基因,使用SEQ ID NO:19至SEQ ID NO:24的测序引物对PCR产物进行扩增,扩增HLA-C的各外显子,然后对扩增出的各外显子进行测序,并将测序结果与数据库中的标准序列进行比较,从而确定基因分型结果。
10.权利要求7的HLA基因分型方法,使用SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4,和SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6的扩增引物对进行PCR扩增,扩增HLA-B和HLA-C基因;并且使用SEQ ID NO:13至SEQ ID NO:18的测序引物和SEQ ID NO:19至SEQ ID NO:24的测序引物对PCR产物进行扩增,分别扩增HLA-B和HLA-C的各外显子,然后对扩增出的各外显子进行测序,并将测序结果与数据库中的标准序列进行比较,从而确定基因分型结果。
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