[发明专利]微生物菌种的存活率及活性的检测方法

权利要求书

1.一种微生物菌种的存活率及活性的检测方法，其包括如下步骤：

A.将微生物菌种溶解在含有噻唑蓝的培养液中，并进行稀释得到菌悬液；

B.将不同稀释梯度的菌悬液加入到培养板的各孔中；和

C.实时扫描测定，根据扫描结果计算菌种的存活率、判断菌种的活性。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤A中的培养液为脑心浸液培养液。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤B中的菌悬液的稀释梯度为10倍梯度。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述步骤C中的存活率是参考大肠菌群最可能数检索表，确定保存菌种中的活菌数量，再将该活菌数量除以菌种开始保存时的活菌数量，从而得到存活率。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

将噻唑蓝用PBS配置成5±0.5％的储备液，灭菌，冰箱保存；将噻唑蓝储备液加入脑心浸液培养液中，使其终浓度达到0.1±0.05％，灭菌，冰箱保存备用；将含有噻唑蓝的脑心浸液加入到培养板的各孔中；将菌种用脑心浸液培养液溶解后，用无菌水进行10倍梯度系列稀释；将各稀释度的菌悬液加入微孔中；将微孔板放入酶标仪中，将培养温度设定为36℃，测定波长为520nm，使用动力学测定模式，每隔一段时间测定1次，连续测定一定时间；根据扫描结果计算菌种的存活率、判断菌种的活性。

6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：将噻唑蓝用PBS配置成5±0.5％的储备液，灭菌，4℃冰箱保存；将噻唑蓝储备液加入脑心浸液培养液中，使其终浓度达到0.1±0.05％，灭菌，4℃冰箱保存备用；将含有噻唑蓝的脑心浸液加入到96孔培养板的各孔中；将菌种用脑心浸液培养液溶解后，用无菌水进行10倍梯度系列稀释到10^-8；将10^-1-10^-8稀释度的菌悬液加入微孔中；将微孔板放入酶标仪中，将培养温度设定为36℃，测定波长为520nm，使用动力学测定模式，每隔30分钟测定1次，连续测定24小时；以测定时间为X轴，以吸收值为Y轴，作每孔的时间-吸收曲线；根据曲线判断菌种活性；参考大肠菌群最可能数检索表，确定保存菌种中的活菌数量，再将该活菌数量除以菌种开始保存时的活菌数量，得到菌种的存活率。