[发明专利]一种抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或抗体片段及其应用

说明书

技术领域

本发明是关于一种用于男性不育症检测的抗体或抗体片段及其应用。

背景技术

在全世界范围内，大约15％的夫妇受到不育症的影响，其中男性不育 症已经成为一个主要的生殖健康问题。随着社会工业化程度的提高和生活 节奏的加快，加上环境污染和不良生活习惯等因素，男性精液质量日趋下 降，男性不育人数呈逐年上升趋势，男性生殖健康的问题越来越受到全社 会的关注。精子发生是一个复杂的过程，它分为精原细胞有丝分裂、精母 细胞减数分裂和精子形成三个阶段。体内这一独特的生命现象，需要一系 列睾丸特异性表达基因的参与，各自发挥着特定的功能。目前已知一些基 因与精子发生密切相关，例如CREM，Ddrl，TESP-1等皆被证明为睾丸 特异性表达基因并在精子发生过程中起重要作用，这些基因的缺失或突变 将导致严重少精子症或无精子症，从而造成不育。因此，筛选和鉴定生精 相关基因有助于进一步了解人类精子形成的分子机制和部分男性不育的原 因。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是，提供一种能够用于男性不育症检测的 抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或抗体片段及其应用。

为解决上述技术问题，本发明提供一种分离的杂交瘤细胞株，其保藏 号为CCTCC NO：C200952。

一种由杂交瘤细胞株hTSC29分泌的抗体或抗体片段。

进一步的，抗体或抗体片段为特异性结合抗睾丸hTSC29蛋白的抗体 或抗体片段。该杂交瘤细胞株hTSC29也可以分泌出能够特异性结合其它 蛋白的抗体或抗体片段。

进一步的，抗体为特异性结合hTSC29蛋白的多克隆抗体或单克隆抗 体。

进一步的，单克隆抗体为IgG，亚类为IgG2b(κ)。

一种抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或抗体片段的应用，所述抗体或抗体 片段与耦联物耦联，所述耦联物为酶、荧光标记物、化学发光标记物或药 物。

一种抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或抗体片段复合物，包括抗睾丸 hTSC29蛋白的抗体或抗体及与其耦联的耦联物，所述耦联物选自标记物、 药物。

所述标记物为酶、荧光标记物或化学发光标记物。

一种药物组合物，包括药学上有效量的抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或 抗体片段及药学上可接受的载体。

一种抗睾丸hTSC29蛋白的抗体或抗体片段在男性不育检测上的应 用。

本发明的有益效果是，申请人筛选出一个人睾丸特异性基因hTSC29， 根据同源性、抗原性、亲水性等参数预测的结果进行综合考虑，最后选取 hTSC29的224-241位氨基酸序列进行合成。经小鼠免疫、细胞融合、筛选 及克隆化，获得了能稳定分泌抗hTSC29 mAb的杂交瘤细胞株，Western blot 鉴定表明，该mAb在人正常睾丸蛋白中相对分子质量(M_r)约为60kDa 处检测到特异条带；免疫组织化学显示hTSC29蛋白主要在正常人睾丸的 精母细胞及圆形精子细胞中表达，此抗体效价高、特异性强，为进一步研 究与hTSC29基因表达相关的男性不育症提供了特异的检测工具。

附图说明

图1是Western blot检测hTSC29 mAb的特异性图，其中，字符1代 表人子宫内膜细胞，2代表白血病细胞，3代表人睾丸组织，GAPDH作为 内参；

图2是hTSC29的免疫组化定位图，箭头所指是hTSC29蛋白质，免 疫组化结果显示，hTSC29 mAb所识别的分子主要定位在正常人睾丸组织 的精母细胞及精子细胞，A为阴性对照；

图3是免疫荧光染色技术检测hTSC29蛋白在睾丸组织中的表达图， 其中，A为阴性对照，B为hTSC29蛋白在人睾丸组织中的定位(箭头所 指)。

具体实施方式