[发明专利]用于核酸PCR产物直接测序的测序引物和测序方法

权利要求书

1.用于核酸PCR产物直接测序的一对测序引物，其特征在于：所 述测序引物的碱基序列分别如SEQ ID NO：1和2所示，所述核酸PCR 产物为核酸PCR扩增所得产物，所述核酸PCR扩增所用的扩增引物分别 包括根据目标核酸序列设计的特异性引物序列和位于特异性引物序列 5’端的所述测序引物序列。

2.用于非疾病诊断目的的核酸PCR产物直接测序的测序方法，其 特征在于：包括以下步骤：

1)根据待检测的目标核酸序列设计并合成一对扩增引物，所述每 条扩增引物包括根据目标核酸序列设计的特异性引物序列和位于特异 性引物序列5’端的测序引物序列，所述位于特异性引物5’端的测序 引物序列分别如SEQ ID NO：1和2所示，合成一对测序引物；

2)采用所述扩增引物对待测样品进行PCR扩增，得到PCR扩增产 物；

3)纯化所述PCR扩增产物，得到纯化的测序反应模板；

4)用纯化的测序反应模板，以所述测序引物进行测序反应，得到 测序反应产物；

5)纯化所述测序反应产物；

6)对纯化的测序反应产物进行序列测定。

3.根据权利要求2所述的用于核酸PCR产物直接测序的测序方法， 其特征在于，所述步骤3)具体为：PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检 测后切下待测目标核苷酸目标扩增片段，经凝胶纯化试剂盒纯化，得到 纯化的测序反应模板。