[发明专利]检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法

权利要求书

1.一种同时分离检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法，其特征在于：包括如下步骤：

(1)将二苯乙烯苷对照品、大黄素对照品、芦荟大黄素对照品、大黄酸对照品、大黄酚对照品和大黄素甲醚对照品溶于甲醇中，制成上述各种对照品浓度均为50μg/mL的对照品混合液；采用胶束电动毛细管色谱法，在最佳检测条件下，对对照品混合液进行毛细管电泳分析，获得对照品混合液的电泳图谱；

(2)采用胶束电动毛细管色谱法，在最佳检测条件下，对何首乌样品提取液进行毛细管电泳分析，获得样品液的电泳图谱；所述何首乌样品提取液是按以下操作步骤进行：将何首乌的干燥块根粉碎，过80～120目筛，取粉末0.2～1.0g，加入甲醇30～60mL，用甲醇超声提取15～30min，过滤，得滤液和滤渣；将滤渣用5～15mL甲醇洗涤2～4次，将洗涤液和上述滤液合并，减压蒸发除去溶剂后加入5mL甲醇溶解，摇匀，经0.22μm滤膜过滤，得到何首乌样品提取液；

(3)分别根据二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的校正曲线方程，根据步骤(2)所得电泳图谱中各对应物质峰面积，计算出何首乌提取液中二苯乙烯苷、大黄素、芦荟大黄素、大黄酸、大黄酚或大黄素甲醚的浓度；

所述最佳检测条件是：内径为75μm、有效长度为50cm的未涂层熔融石英毛细管、电泳缓冲液组成为15mmol/L硼砂-30mmol/L十二烷基硫酸钠-体积比10％甲醇、pH为9.6、分离电压为25kV、检测温度为25℃、进样压力为0.5psi、进样时间为10秒和检测波长为254nm。

2.根据权利要求1所述的一种同时分离检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法，其特征在于：所述超声提取是采用60W的超声提取。

3.根据权利要求1所述的一种同时分离检测何首乌中二苯乙烯苷和蒽醌类成分的毛细管电泳方法，其特征在于：对毛细管进行以下处理：

(1)毛细管在第一次使用前，按以下的程序进行预处理：先用甲醇冲洗10min，去离子水冲洗2min，接着用0.1mol/L盐酸冲洗10min，去离子水冲洗2min，最后用0.1mol/L氢氧化钠溶液冲洗10min，去离子水冲洗2min；

(2)每次操作之前，毛细管依次分别用0.1mol/L盐酸、去离子水、0.1mol/L氢氧化钠、去离子水冲洗5min，然后再用电泳缓冲液冲洗5min。