[发明专利]一种新型猪链球菌病三价灭活疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及兽医生物制品技术领域，特别涉及一种猪链球菌病三价灭活疫苗。 

背景技术

猪链球菌病是一种常见的传染病，是由多种不同群的链球菌引起的不同症状类型的总称。目前许多国家和地区都有猪链球菌病的报道，并且其流行呈明显上升趋势。该病以导致猪败血症、化脓性淋巴结炎、脑膜炎、关节炎为主要特征，在某些特定诱因作用下，发病猪群死亡率可达80％左右，严重威胁着养猪业的发展。 

国内猪链球菌病自上世纪60年代以来，在广西、广东、福建、湖南、江西、安徽、江苏、四川等地陆续发生，该病流行范围广、发病率和死亡率高，造成了严重的经济损失。链球菌的血清群多，主要为兰氏C群，其次为兰氏D、E群。各血清群之间交互免疫能力不强，加之菌株易变等特点，所以，有些猪场虽然进行了该病的免疫预防，但仍得不到有效控制，免疫失败现象时有发生。究其原因，主要是接种疫苗的菌株血清群与当时当地流行的猪链球菌病的病原血清群不相符所致。近年来，在我国各地发生的猪链球菌病，其病原血清群各有差异，不尽相同，给该病的预防和治疗带来了一定难度。目前用于猪链球菌病免疫预防的疫苗主要是以C群兽疫链球菌为疫苗株的灭活疫苗或弱毒疫苗，而该病的病原流行菌株已不局限于C群兽疫链球菌，D、E、L、R等血清群的链球菌在病原学调查中也占有一定比例。因此，需要发明一种新的猪链球菌病三价灭活疫苗以解决上述问题。 

发明内容

本发明的目的之一是提供一种安全、可靠的猪链球菌病三价灭活疫苗，所述疫苗可同时预防免疫由兰氏C群、D群和E群链球菌引起的三种猪链球菌病。 

本发明的另一个目的是提供一种制备猪链球菌病三价灭活疫苗的方法。 

本发明提供一种猪链球菌病三价灭活疫苗，所述猪链球菌病三价灭活疫苗包含抗原和佐剂；其中，所述抗原由已灭活的兰氏C群马链球菌兽疫亚种C55138抗原、兰氏D群链球菌C55914抗原和兰氏E群链球菌C55949抗原组成；所述佐剂为氢氧化铝胶。 

作为本发明猪链球菌三价灭活疫苗的优选实施方式，所述三种抗原等比例混合，其总体积为所述疫苗总体积的75％～85％。 

作为本发明猪链球菌病三价灭活疫苗的优选实施方式，所述佐剂的体积为所述疫苗总体积的15％～25％。 

作为本发明猪链球菌病三价灭活疫苗的优选实施方式，所述疫苗中还含有所述疫苗总量0.01％的硫柳汞。 

一种猪链球菌病三价灭活疫苗的制备方法，包含以下步骤： 

a.分别将C群C55138菌种、D群C55914菌种和E群C55949菌种增殖培养，得到C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液； 

b.分别向上述培养好C群C55 138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液中按总量加入0.2％的甲醛溶液，放置于37℃灭活，其间搅拌3～5次。 

c.向上述已灭活的C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液中加入适量的15％～25％氢氧化铝胶摇匀，常温静置沉淀48～72小时，氢氧化铝胶和所述菌液中的抗原结合形成颗粒状结合物，静置，在重力作用下沉降。除去上层清液后，以无菌生理盐水重悬沉淀物，从而得到已浓缩、去除毒素的C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液； 

d.分别将上述已去除毒素的C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液等比例混合均匀，并加入一定量的疫苗防腐剂硫柳 汞，从而得到新型猪链球菌病三价灭活疫苗； 

e.以适量体积分装猪链球菌病三价灭活疫苗，盖上瓶盖，并压铝盖。 

在上述制备过程中，从步骤a培养好的C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液中取样，进行纯粹检验和活菌计数；从步骤b已灭活的C群C55138菌液、D群C55914菌液和E群C55949菌液取样进行灭活检验和安检；对步骤d得到的猪链球菌病三价灭活疫苗进行无菌检验、安全检验和疫苗效力检验，以确保疫苗的安全性、可靠性。