[发明专利]虫草素提取物和在制备降血糖药物或保健食品中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及生物制药技术领域，具体涉及具有药用价值的真菌提取物，尤 其涉及一种虫草素提取物和在制备降血糖药物或保健食品中的应用。

背景技术

虫草素(3’-脱氧腺苷)是从蛹虫草中提纯出的一种晶体，是一种新型 的核苷类抗菌素，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用，已引起全 球科技发达国家的高度重视。它对枯草杆菌和念珠菌菌株均有抑制作用； 对HIV-I得逆转录酶也有抑制作用；尤其对多种恶性肿瘤有很强的抑制作 用。因此，将虫草素作为一种用途广泛的新药来开发是必然的趋势。

虫草素主要有化学合成制得和蛹虫草中提取纯化两种来源，常见的是 从蛹虫草固体培养子座或蛹虫草液体培养菌丝体和培养液中提取纯化而 得。常见的虫草素提取纯化方法有离子树脂吸附法、活性炭吸附法和超临界 萃取技术，然而这些方法的提取纯化效果并不太理想，如离子树脂吸附法分离 纯化的虫草素较少，提取率较低，活性炭吸附法吸附选择性差，得率低，超临 界萃取提取方法所需设备复杂，需要的成本也比较高。

目前虽然有研究表明蛹虫草具有降血糖降血脂的作用，但该作用并不 是虫草素赋予的，目前尚未见有虫草素具有降血糖作用的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种提取方法简单、成本低、提取纯化效果好，且 具有降血糖作用的虫草素提取物。

本发明的另一个目的在于提供上述虫草素提取物在制备降血糖药物或保 健食品中的应用。

本发明的上述目的是通过如下方案予以实现的：

一种虫草素提取物，该提取物是采用大孔树脂D-101从蛹虫草液体培养 液中提取纯化而得，该提取物经检测，其中主要包含虫草素、蛋白质和糖，且 虫草素的含量能够达到提取物总质量的60％以上。

上述虫草素提取物，是先将蛹虫草液体培养液进行预处理后获得的上柱液 上样大孔树脂D-101，调节上柱液的pH为9.0，以40mL/h的流速进样，当 进样量达到568mL时，树脂达到完全饱和。此时，饱和动态吸附量为0.183mg/g， 然后采用体积百分比浓度为55％的乙醇作为洗脱剂，进行洗脱，收集洗脱液， 浓缩冷冻干燥后得到所需虫草素提取物，该虫草素提取物经高效液相色谱法测 定含虫草素61.55％，经考马斯亮兰法测定含蛋白质11.15％，经苯酚硫酸法测 定含总糖8.51％。

上述蛹虫草液体培养液进行预处理，其操作是：先将蛹虫草液体培养液进 行适量的浓缩，得到浓缩液，然后用无水乙醇沉淀浓缩液中的多糖与蛋白，最 后离心去除杂质，收集上清液即可作为上样样品。

上述蛹虫草液体培养液进行预处理操作中，浓缩是将蛹虫草液体培养液浓 缩至原体积的1/5，浓缩温度为60℃。

上述蛹虫草液体培养液进行预处理操作中，采用占浓缩液4倍体积的无水 乙醇沉淀多糖与蛋白24小时；

上述大孔树脂D-101在使用前，先进行预处理：将树脂用蒸馏水充分淋 洗，除去破碎和粒度极小的树脂；用80％的乙醇溶液浸泡过夜，去掉残留在 树脂中的溶剂，并活化树脂；再分别用4％氢氧化钠溶液和4％盐酸溶液顺序 浸泡3～5h，以除去树脂中的杂质，最后用蒸馏水反复冲洗至中性。

本发明对上述制备所得虫草素提取物进行降血糖功效测试，首先对四氧嘧 啶实验性糖尿病小鼠进行腹腔注射虫草素，然后观察小鼠空腹血糖值、口服葡 萄糖耐量(OGTT)、脏器指数、体重、摄食量和饮水量等指标的变化，结果 表明，剂量为72mg/kg·d虫草素提取物能使高血糖模型小鼠的空腹血糖值下降 46.67％(P＜0.01)，口服葡萄糖耐量试验中的血糖AUC下降25.12％(P＜0.01)， 肾指数增加23.75％(P＜0.05)，脾指数增加26.65％(P＜0.05)，体重增加9.14 ％(P＜0.05)，日摄食量减少25.05％(P＜0.01)，日饮水量减少21.49％(P ＜0.01)，由此说明，虫草素具有良好的降血糖作用，改善糖尿病的多饮多食 症状，而且对肾脏与脾具有保护作用，从而克服了现有降血糖药物对肾脏脾 脏伤害较大的问题，可作为生产虫草素单体、降血糖药物与降血糖保健食品开 发的原料。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

1.本发明的虫草素提取物，其制备方法选择大孔树脂D-101的吸附处理， 并对吸附处理过程中的参数进行优化选择，与现有方法相比，不但操作简单， 工艺条件易控制，而且虫草素提取纯度高；