[发明专利]半定量检测类风湿因子方法无效
申请号: | 200910194749.3 | 申请日: | 2009-08-28 |
公开(公告)号: | CN102004153A | 公开(公告)日: | 2011-04-06 |
发明(设计)人: | 许荣;钟丽民;周丽萍;马海龙 | 申请(专利权)人: | 上海市长宁区光华中西医结合医院 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/566 |
代理公司: | 上海衡方知识产权代理有限公司 31234 | 代理人: | 卞孜真;包文超 |
地址: | 200052 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定量 检测 类风湿 因子 方法 | ||
1.一种半定量检测类风湿因子方法,其特征如下:
1)将待测血清先于40-56℃温度下,灭能10分钟到1小时后,将甘氨酸缓冲液按1∶20对血清进行稀释,所得1∶20的稀释血清;
2)取出所述的稀释血清用甘氨酸缓冲液逐次对倍稀释成9种不同浓度,依次为:1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280、1∶2560、1∶5120和1∶10240;
3)分别取出相同体积的所述10种浓度的稀释血清,分别加入等体积的结合有人血丙种球蛋白的聚苯乙烯胶乳,使得血清稀释度分别为1∶40、1∶80、1∶160、1∶320、1∶640、1∶1280、1∶2560、1∶5120、1∶10240和1∶20480,即得10种稀释血清1;
4)将所述的10种稀释血清1稀释于试管中混匀后在40-56℃温度下,置于1-2小时,取出冷却,并于0-20℃温度下过夜。
2.根据权利要求1所述的半定量检测类风湿因子方法,其特征是人血丙种球蛋白的聚苯乙烯胶乳的制备方法为:
1)930ml的将所述的甘氨酸缓冲液中加入空白聚苯乙烯胶乳液10ml和0.5%人血丙种球蛋白60ml,混匀后,放置于37℃1小时,并不时搅拌混匀,得到制备液;
2)取出步骤一所述的制备液,以2,000-5000转/分钟速度离心30分钟到1个小时;
3)弃去离心上清液,沉淀物用1000ml所述的甘氨酸缓冲液搅拌均匀后,再次以2,000-5000转/分钟速度离心30分钟到1个小时;
4)再弃去离心上清液,沉淀物中加入含有0.3%牛血清白蛋白的甘氨酸缓冲液1000ml。
3.根据权利要求1所述的半定量检测类风湿因子方法,其特征是所述的甘氨酸缓冲液为每1000ml水中加入15g甘氨酸、17g氯化钠和0.5g氢氧化钠。
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