[发明专利]小RNA-326制备药物的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域。具体地说，本发明涉及miRNA-326作为靶标在诊断和/或治疗由IL-17介导的自身免疫疾病、以及筛选治疗由IL-17介导的自身免疫疾病的潜在物质中的应用。

背景技术

众所周知，在抗原的刺激下，幼稚CD4⁺T细胞会分化成不同亚型的效应T细胞并参与获得性免疫反应。T_H17细胞是一类新发现的效应T细胞。分化成熟的T_H17可以分泌IL-17、IL-21、IL-22等多种细胞因子，其中IL-17在多种自身免疫疾病和炎性疾病中起关键作用。其一方面帮助宿主清楚外来抗原物质，另一方面，在自身免疫疾病中，它还会诱导炎症反应^1，2。

现已发现，T_H17细胞的分化可以被包括RORγt³和RORα⁴在内的转录因子直接调控，同时一系列的正向和反向调节因子对于该细胞的分化可以起到协同调节的作用^5-8。尽管越来越多的分子被发现可以调节T_H17细胞的分化，然而，联系T_H17细胞的分化与疾病(例如自身免疫疾病)的因子却少见报道，而这一类因子的鉴定恰恰具有重要的生物学意义。

作为一类器官特异性的自身免疫疾病，多发性硬化(MS)疾病的病理表现为中枢神经系统的急性炎症并导致脱髓鞘发生，是导致年轻人非创伤性神经系统瘫痪以及残疾的最重要的诱因之一。MS临床表现多为非均质型，超过80％的病人表现为反复的缓解复发表型。由于疾病的发生机制不明，以及目前尚缺乏灵敏的诊断标志，对于MS的诊断仍然只能依据疾病在时间和空间上的多发性。而且，许多其它疾病例如视神经脊髓炎和MS有着极为相似的病症，因此，目前对于MS的治疗甚至是诊断仍然十分困难。众所周知，CD4⁺T细胞对于MS的发病，至少是早期疾病的启动有着重要作用。早先的研究认为，T_H1细胞(以产生IFN-为特征)对于疾病的发生有着重要的作用⁹。随着T_H17的发现，越来越多的证据表明后者在MS的发病中有着不次于T_H1的作用，例如，T_H17细胞数量少的小鼠不易得实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE，为MS的公认的实验动物模型)¹⁰，MS病人的脑组织病灶中鉴定出了T_H17细胞等¹¹。尽管以上迹象表明了T_H17在MS中的重要作用，而对于T_H17细胞分化的深层次调控的揭示，以及T_H17在MS临床上的应用(鉴定T_H17相关的诊断标记抑或是发展针对T_H17的治疗策略)还尚缺乏很好的阐明。

MicroRNA(也称小RNA或微小RNA)代表了一大类内源性的非编码RNA，它是一种单链非编码短RNA，约20-24个核酸，在转录后水平上调节基因表达¹²。它通过与mRNA分子的3’端非编码区域(3′UTR)互补匹配导致mRNA分子的翻译受到抑制。当表达调控失调时，会导致多种人类疾病^13，14，因此它们有望成为很好的诊断、预后标记已及治疗的靶标^15，16，最新的研究表结果表明生物体中MicroRNA的失调会导致自身免疫疾病症状的出现^17，18，这一结果暗示了MicroRNA在自身免疫疾病的中有着重要作用，然而直接的证据还有待进一步揭示。

发明内容

为了解决本领域中的上述问题，本发明的一个目的是提供一种新的用于诊断和/或治疗包括多发性硬化在内的各种自身免疫疾病的方法和制剂。本发明另一目的是提供筛选筛选治疗由IL-17介导的自身免疫疾病的潜在物质的方法。

本发明第一方面提供了一种分离的核酸序列，所述核酸序列由以下核酸序列(I)组成或由n个所述核酸序列(I)串联而成，其中n为2-20，

5’ACTGGAGGAAXXXGGGAGAGG 3’(I)

其中X独立选自A，T，C或G。

在一个较佳的实施方案中，所述核酸序列(I)是5’ACTGGAGGAACCCGGGAGAGG3’。在另一个较佳的实施方案中，所述n为5-10。在另一个较佳的实施方案中，所述核酸序列(I)中自5′端起第1-10位、第14-21位中的一个或多个核苷酸被锁核苷酸修饰。