[发明专利]一种天蓝淡红链霉菌的基因阻断突变菌及其制备方法

权利要求书

1.一种天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus的基因阻断突变菌，其特征在于，被阻断的基因是dauW基因。

2.根据权利要求1所述的基因阻断突变菌，其特征在于，所述的天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus是天蓝淡红链霉菌Streptomycescoeruleorubidus SIPI-1482。

3.根据权利要求1所述的基因阻断突变菌，其特征在于，所述的dauW基因被外源基因插入而阻断。

4.根据权利要求1所述的基因阻断突变菌，其特征在于，所述的外源基因是大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒。

5.根据权利要求4所述的基因阻断突变菌，其特征在于，所述的大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒是pKC1139。

6.一种制备如权利要求1～5任一项所述的天蓝淡红链霉菌Streptomycescoeruleorubidus的基因阻断突变菌的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)将dauW基因克隆入载体，获得含有dauW基因的重组表达载体；

2)将含有dauW基因的重组表达载体转化宿主细胞，获得转化子；

3)将天蓝淡红链霉菌Streptomyces coeruleorubidus作为受体，与步骤2)所述的转化子进行接合转移，获得接合子，即天蓝淡红链霉菌的dauW基因阻断突变菌。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤1)所述的载体是大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒pKC1139。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的宿主细胞是大肠杆菌。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤3)所述的受体是天蓝淡红链霉菌孢子，孢子预萌发后作为受体，预萌发条件为50℃热激10分钟。

10.一种制备柔红霉素的方法，包括培养产柔红霉素的天蓝淡红链霉菌的基因工程菌，从培养物中分离柔红霉素，其特征在于，所述的产柔红霉素的天蓝淡红链霉菌的基因工程菌是权利要求1～5任一项所述的天蓝淡红链霉菌的基因阻断突变菌。