[发明专利]紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分GS-C、其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分GS-C、其制备方法和用途。

背景技术

食药用真菌具有抗肿瘤抗病毒、降血脂、延缓衰老、护肝排毒、促进核酸和蛋白质生物合成等多种功效，在中国有悠久的使用历史。国内外大量研究表明，真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离得到的，为真菌类药物的药效部位，是能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老的一类活性多糖。

紫芝(Ganoderma sinense)作为灵芝属真菌(2005版中国药典)，其有较明显的抗肿瘤、提高免疫力的功效。由于其制备工艺不明确，多糖含量较低(一般＜60％)。另外紫芝粗多糖组分复杂，主要药效部位和组分尚未阐明。且由于紫芝子实体资源稀少，市场上少见紫芝产品。

紫芝粗多糖溶解度很差，粘度较大，颜色深，味重，其分子量从几千到上千万，分子量跨度很大，难找到合适的质量控制方法。研究表明，分子量是影响多糖组分药效的主要因素之一，若能将粗多糖分割成不同分子量段的多糖组分，阐明其构效关系，不仅能提高药效水平，并且对质量控制有很大的帮助。

传统的制备一定分子量多糖主要为水提醇沉分级沉淀法，该方法得到的多糖含量低，且常与其他大分子杂质混杂。用纤维素-凝胶分离纯化方法，可以将一定纯度的多糖混合样品纯化得到精制的多糖，但一般适合的条件为实验室规模，难于实现生产。

中国专利200710045369.4“一种紫芝发酵方法及制得的紫芝菌丝体”公开了一种紫芝液体深层发酵产生菌丝体的方法，该菌丝体用水提醇沉法提取得到的粗多糖含量在39～75％，其体内药理实验中，口服剂量为40mg/kg/天时有一定抗肿瘤活性。中国专利200710045368.x“紫芝菌丝体胞内多糖及其制备方法和应用”公开了一种从紫芝液体深层发酵产生的菌丝体中提取制备得到粗多糖的方法。该方法涉及的水提醇沉法提取得到粗多糖含量在39～75％。其药理实验的剂量也为40mg/kg/day(给药方式：口服喂药)。杨国红，杨义芳，金隽迪(紫芝液体深层发酵的抗肿瘤活性部位研究[J].中草药，2008，39(6)：877-880)对紫芝液体深层发酵的抗肿瘤活性多糖进行了研究，从紫芝菌丝体中提取得到胞内多糖，其药理实验的剂量也为40mg/kg/天(给药方式：口服喂药)。然而，以上专利和文章均未涉及多糖分子量、和纯度的研究。

鉴于现有技术的状况，需要寻找多糖含量高、分子量范围集中、具有明显的抗肿瘤活性且给药剂量比常规方法提取得到的粗多糖的更低的紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种多糖含量高、分子量范围集中、抗肿瘤活性更明显且给药剂量更低的紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分。

本发明的第一个目的在于提供一种紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分，将其命名为GS-C，所述多糖组分GS-C含有多糖和单糖，其特征在于，所述多糖含量为85-90wt％。

进一步，本发明所述多糖组分GS-C中多糖的分子量为大于50万道尔顿。

进一步，经TLC和HPLC分析可以得知，所述多糖组分GS-C中的多糖由半乳糖和鼠李糖组成，所述半乳糖和鼠李糖的摩尔比为3.50-3.52∶1，优选3.5∶1。

本发明结合膜技术和透析法将不同分子量多糖分离，以达到提高多糖含量，缩小分子量范围，从而得到紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分GS-C，该多糖组分GS-C在降低给药剂量、并且不增加毒性的前提下能达到与传统方法得到的紫芝菌丝体多糖相当的药效。

超滤技术是指常温下以一定压力和流量，利用不对称微孔结构和半透膜分离介质、以错流方式进行过滤，使溶剂及小分子物质通过，高分子物质被滤膜阻留，从而达到分离过程无相变、分离效率高、无需添加化学试剂无污染、无需加热、能耗低、条件温和不破坏成分、操作方便、流程短的特点。利用膜技术能将不同分子量的样品分割开。

透析法是利用半透膜，将不可透析的大分子被截留于膜内，可透析的小分子经扩散作用不大透出膜外，直到达到膜两边浓度平衡。透析膜的孔径选择范围较大，选择合适的透析膜，可使小至上百，大至几百万的分子分离。

因此，本发明的第二个目的在于提供上述紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分GS-C的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：紫芝菌丝体经水提醇沉得到粗多糖，粗多糖经超滤、浓缩和透析，得到紫芝菌丝体抗肿瘤多糖组分GS-C。

上述制备方法简单易行、生产周期短、成本较低廉。

作为本发明的进一步改进，超滤步骤通过超滤膜进行。选择截留分子量为1-5万的超滤膜。更优选地，所述超滤膜的截留分子量为3万。