[发明专利]紫芝菌丝体多糖精制物、其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种紫芝菌丝体多糖精制物、其制备方法和其在医药领域的用途。

背景技术

食药用真菌具有抗肿瘤抗病毒、降血脂、延缓衰老、护肝排毒、促进核酸和蛋白质生物合成等多种功效，在中国有悠久的使用历史。国内外大量研究表明，真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离得到的，为真菌类药物的药效部位，是能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老的一类活性多糖。

紫芝(Ganoderma Sinense Zhao，Xu et Zhang)是一种高等真菌，属担子菌纲，多孔菌目，多孔菌科，灵芝属。有利关节，保神，益精气，坚筋骨，好颜色，疗虚劳等滋补强壮的功效。国内外对同属异种的赤芝(常作灵芝)研究较多，但对紫芝的研究较少。紫芝含有多糖、蛋白质、氨基酸等大分子物质，也含生物碱、三萜类、甾醇、香豆素、酚类等小分子物质。目前研究发现，紫芝提取物(以多糖为主)具有抗肿瘤、抗辐射、升高白细胞的作用。

对紫芝多糖研究尚处于起步阶段，紫芝粗多糖一般含量较低(低于40％)，且其组分复杂，且由于紫芝子实体资源稀少，市场上少见紫芝产品。

紫芝野生资源贫乏，人工栽培受到自然因素、管理因素的制约致使原料质量不可控，目前也并不能规模化生产，从而从资源角度影响了紫芝的开发。目前液体深层发酵技术已经在生物领域有较为成熟的应用，其生产菌丝体不受外界环境影响，产量大，且品质与天然相当甚至由于天然。利用深层发酵产生紫芝菌丝体工艺可解决其资源问题，并且达到质量可控，最后实现工业化生产。

从紫芝液体深层发酵得到的菌丝体中提取得到多糖，经药理实验证明其有明显的抗肿瘤作用。中国专利200710045369.4“一种紫芝发酵方法及制得的紫芝菌丝体”公开了一种紫芝液体深层发酵产生菌丝体的方法，中国专利200710045368.x“紫芝菌丝体胞内多糖及其制备方法和应用”公开了一种从紫芝液体深层发酵产生的菌丝体中提取制备得到粗多糖的方法。上述专利涉及的该菌丝体用水提醇沉法提取得到的粗多糖含量在39～75％。其药理实验的剂量均为40mg/kg/day(给药方式：口服喂药)，对小鼠H22肝癌和Lewis肺癌的抑制率分别在45～55％和40～50％。杨国红，杨义芳，金隽迪(紫芝液体深层发酵的抗肿瘤活性部位研究[J].中草药，2008，39(6)：877-880)对紫芝液体深层发酵的抗肿瘤活性多糖进行了研究，从紫芝菌丝体中提取得到胞内多糖，其药理实验的剂量也为40mg/kg/day(给药方式：口服喂药)，显示有明显的抗肿瘤活性。以上专利和文章均未涉及多糖分子量和多糖单糖组成的研究。

传统多糖提取方法用水提醇沉法，该法得到的粗多糖含量低，多糖组分复杂，并同时含有蛋白质色素等大分子成分。

鉴于现有技术的状况，需要寻找多糖含量高、分子量范围集中、去除蛋白质等杂质、具有明显的抗肿瘤活性且给药剂量小于常规方法提取得到的粗多糖的紫芝菌丝体多糖精制物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种紫芝菌丝体多糖精制物，其多糖含量高、分子量范围小、去除蛋白质等杂质、具有明显的抗肿瘤活性且给药剂量小于常规方法提取得到的粗多糖。

本发明的第一个目的是提供一种紫芝菌丝体多糖精制物，所述多糖精制物含有多糖和单糖，其特征在于，所述多糖的含量大于90％，所述单糖的含量小于5％。

进一步地，所述多糖精制物不含有蛋白质。

进一步地，所述多糖精制物中多糖的分子量为10万-200万。

对本发明多糖精制物的结构进行研究得知，其含有的多糖由半乳糖和鼠李糖组成，其摩尔比为15∶1～17.4∶1，优选15∶1。

本发明采用膜技术和季铵盐沉淀法缩小紫芝菌丝体多糖的分子量范围，并去除蛋白质等杂质，从而得到多糖精制物。

本发明的第二个目的是提供上述紫芝菌丝体多糖精制物的制备方法，包括如下步骤：紫芝菌丝体经水提醇沉得到粗多糖，粗多糖经超滤、浓缩和盐析，得到紫芝菌丝体多糖精制物。

所得紫芝菌丝体多糖精制物中多糖含量大于90％，不含蛋白质。其生产工艺简单，可行。

作为本发明的进一步优选，所述超滤步骤通过截留分子量为1-5万的超滤膜进行。更优选地，所述超滤膜的截留分子量为3万。

作为本发明的进一步优选，所述超滤膜由聚酰胺、聚醚砜膜或醋酸纤维素制成。

作为本发明的进一步优选，所述浓缩步骤通过纳滤膜进行。优选截留分子量为150-300的纳滤膜。优选由聚酰胺制成的纳滤膜。