[发明专利]β-1,4半乳糖基转移酶I在制备肝癌诊断制剂中的应用

权利要求书

1.β-4半乳糖基转移酶I在制备肝癌诊断制剂中的应用，其中，将肝组织或者血液样本中β-1，4半乳糖基转移酶I活性作为肝癌诊断指标；所述的β-1，4半乳糖基转移酶I活性增强是指组织样本的β-1，4半乳糖基转移酶I表达量增加，或者样本中β-1，4半乳糖苷键的数量的增加。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将肝组织和血液中β-1，4半乳糖基转移酶I活性增强作为肝癌初筛的诊断指标。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，将肝组织和血液中β-1，4半乳糖基转移酶I活性增强作为肝癌术后复发的诊断指标。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，其中肝组织样本的β-1，4半乳糖基转移酶I表达量的检测方法是：提取肝组织样本的RNA，然后反转录成cDNA，扩增β-1，4半乳糖基转移酶I的核苷酸编码序列，所得产物多于对照的即为肝组织样本的β-1，4半乳糖基转移酶I表达量增加。

5.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述肝组织样本中β-1，4半乳糖苷键数量的检测方法是：将肝组织样本制成石蜡切片，脱蜡入水；加入H2O2或者甲醇阻断内源性的过氧化物酶，加入抗生物素蛋白阻断内源性的生物素；唾液酸酶消化，封闭，然后加入生物素-蓖麻凝集素-I孵育过夜；加入标记过的抗生物素蛋白-生物素孵育，显色；对照组用羊血清代替生物素-蓖麻凝集素-I，或者在加入生物素-蓖麻凝集素-I的同时添加半乳糖竞争抑制。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，采用辣根过氧化酶进行标记，二氨基联苯胺显色。

7.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，血液样本中β-1，4半乳糖苷键数量的检测方法是：提取血液样本中的血清蛋白，western blot转移到PVDF膜，封闭过夜，与标记过的蓖麻凝集素-I孵育，洗膜，然后检测蓖麻凝集素-I的结合数量，蓖麻凝集素-I的结合数量的增加即为肝组织样本中β-1，4半乳糖苷键数量的增加。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，采用辣根过氧化酶进行标记，ECL化学发光系统检测蓖麻凝集素-I的结合数量。