[发明专利]一种汽雾式菌根真菌的生产方法及生产设备

权利要求书

1.一种汽雾式菌根真菌的生产方法，其特征在于包括如下步骤：

(1)、宿主植物的选择

选取的宿主植物为白喜草(Paspalum notatum Flugge)；

(2)、菌根真菌的菌种选用

选用包括Glomus intraradices，Glomus aggregatum，Glomusmosseae三种混合丛枝菌根真菌的繁殖体的菌剂，每克菌根真菌的混合物有150个孢子；

(3)、白喜草与菌根真菌共生生长时用的营养液，即气雾营养液的配方为：

母液：                 每升营养液所用的量(mL/L)

0.01M KH₂PO₄           0.3

1.00M KNO₃             1.5

1.00M Ca(NO3)₂.4H₂O    1.5

1.00M MgSO₄.7H₂O       0.3

0.1M  NaCl             0.3

0.1M  NaFeEDTA         0.45

微量元素               1.0

控制pH在6.0到6.8之内；

其中微量元素的组成如下：

46.20mM H₃BO₃

9.53mM  MnCl₂.4H₂O

0.765mM ZnSO₄.7H₂O

0.32mM  CuSO₄.5H₂O

0.066mM Na₂MoO₄.2H₂O

(4)、培养环境

气雾式生长箱放在有35％的遮阴网的温室内，温室的温度范围是26～37℃，最高的光合作用光线强度(photosynthetic photonflux density PPDF)为1100μmoles/s/m²；

(5)培养步骤

①、宿主植物的培养

在128穴孔的园艺穴盘内装上蛭石，置于温室生长床上，用水浇透，每穴孔播种十粒白喜草草种，每天取，含量为20％氮肥，五氧化二磷含量为20％，氧化钾含量为20％的混合型水溶性肥料按其与水的质量体积比0.5g/L溶于水后进行施肥，每天浇水一次，让百喜草在穴盘内生长14天；

②、宿主植物与菌根真菌的共生培养

14天后，把百喜草从穴孔中拿起，取1克含有菌根真菌的混合物与每穴孔的百喜草根部混合，用上述的营养液在穴盘中继续生长28天，28天后，用Trypan Blue法来确定百喜草的根有菌根真菌共生，再把有菌根真菌共生的百喜草用1mm厚2cm宽的海绵布把百喜草的根茎部包起，插入预先放置好白喜草与菌根真菌的生长箱盖上孔内，进行培养；

培养开始后，通过控制汽雾式菌根真菌的生产方法所用的设备的喷雾控制器，控制汽雾开启的时间，控制营养液的每天上午五点到下午八点开启，每1min喷雾10s，每两周更换营养液，更换后的营养液在培养时，每天检测营养液中的pH与EC值，保证pH为6.2，保持EC在0.8～2.0，否则也要更换营养液；

③、菌根真菌的收获

生长箱上培养21天以后，开始采收菌根真菌，采收时，让喜草的根部留10cm长，其余的部分用剪刀剪下，将根与菌根真菌一起晒干后切成0.5cm的碎段，每克干重根所产生的混合物含孢子数平均为6000个，与矽藻土按重量比为1∶40的比例混合后装袋，混合后的孢子数为每克150个；

④、收获后菌根真菌的保藏

与矽藻土混合好的菌根真菌样品存放在4℃的冷藏库内备用。