[发明专利]高效内切葡聚糖酶RuCelB,其编码基因、制备方法与应用

权利要求书

1.一种具有内切葡聚糖酶活性的多肽，其特征在于，该多肽含有SEQ IDNO.2的第25-336位的氨基酸残基序列。

2.如权利要求1所述的多肽，其特征在于，该多肽序列如SEQID NO.2所示。

3.如权利要求1所述的多肽的编码基因，其特征在于，其核苷酸编码序列含有SEQ ID NO.1中第72-1008位的DNA序列。

4.如权利要求3所述的编码基因，其特征在于，其核苷酸编码序列如SEQ ID NO.1所示。

5.权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，按照SEQ ID NO.2的第25-336位的氨基酸残基序列人工合成所述的多肽。

6.权利要求1所述的多肽的制备方法，其特征在于，取牦牛的瘤胃内容物，构建瘤胃未培养细菌宏基因组文库；筛选能够水解羧甲基纤维素钠的阳性克隆；通过构建亚克隆、同源对比方法获得内切葡聚糖酶编码基因；将内切葡聚糖酶编码基因克隆入重组表达载体，导入宿主细胞，获得重组表达的内切葡聚糖酶。

7.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的重组表达载体是大肠杆菌表达载体、酵母表达载体、枯草杆菌表达载体、乳酸菌表达载体、丝状真菌表达载体、昆虫表达载体或者哺乳动物细胞表达载体中的任意一种。

8.如权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述的宿主细胞是Escherichia coliBL21、E.coli JM109、E.coli DH5α、Saccharomycescerevisiae、Pichia pastoris、Kluyveromyces lactis、Bacillus subtilisR25、Bacillus subtilis 9920、Lac tic acid bac teria COCC 101、Trichodermaviride，Trichoderma reesei、Aspergilius niger、Bombyx mori、An tharaeaeucalypti、CHO或者CHL细胞中的任意一种。

9.权利要求1所述的多肽的应用，其特征在于，将其用于纤维素降解。

10.权利要求1所述的多肽的应用，其特征在于，将其用于三糖底物MU-纤维二糖的降解。