[发明专利]移动载体式培养干细胞等治疗用细胞的方法和装置

说明书

技术领域

本发明涉及一种细胞培养系统，具体是一种移动载体式培养干细胞等治疗用细胞的装置和方法。

背景技术

自从1998年詹姆士·汤姆生(James Thomson)从人类体外受精卵取得胚胎干细胞，并能稳定地在体外培养之后，干细胞等其他治疗用细胞的细胞培养装置(如：培养瓶、培养袋等)相对固定，培养过程和方法也日趋成熟。其共同特点是：在培养瓶、培养袋等细胞培养装置中，接种干细胞等其他治疗用细胞。在合适的条件下培养一定时间后，需打开培养装置，通过换液去掉非贴壁细胞。在贴壁细胞达到一定数量以后，再次打开培养装置，通过酶解消化、吹打等步骤回收细胞或作为种子进行传代。整个实验过程会对细胞造成极大的损伤，使用这样的细胞作为传代的种子，非常不利于干细胞的培养和扩增。实验操作繁琐、费时，而且多次打开培养装置也增加了染菌的危险。因此，在原有的设计在硬件上不能满足需要的前提下，一种可移动载体培养制备及扩增干细胞等其他治疗用细胞的细胞培养装置、过程和方法可起到保证细胞不受损伤，实验操作简单方便，降低染菌风险等作用。

经对现有技术文献的检索发现，FENG GAO等人在《TranslationalResearch》2008，151：293-302上发表的″In vitro cultivation of islet-like cellclusters from human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells″(人类脐带血间充质干细胞岛状细胞团的体外培养)一文中，提出首先从人类脐带血中分离出来单核的间充质干细胞，以5.5mmol/L葡萄糖水溶液(含30％的小牛血清蛋白)进行种子培养。将细胞浓度稀释到1×10⁶cells/L，将其接种到T25型培养瓶中，在浓度为5％的CO₂培养箱内培养，8天后换液并洗去未贴壁细胞。当细胞长满培养瓶底部后，打开瓶口，加入浓度为0.25％胰酶-EDTA进行酶解消化并吹打，从而收获细胞或作为种子进行传代。其不足之处是：该细胞培养系统每次传代培养都要经过换液、酶解消化、吹打等步骤。这使细胞受到严重损伤，传代培养受到影响，并且增加了在培养装置内部的工作量，耗时而费力，增加了染菌的风险，为干细胞等治疗用细胞在医疗上的应用带来安全隐患。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种移动载体式培养干细胞的装置，以解决现有培养装置中对细胞的损害，以及操作繁琐，容易染菌的技术问题。

本发明的第二目的在于提供一种移动载体式培养治疗用细胞的方法，以解决现有培养装置中对细胞的损害，以及操作繁琐，容易染菌的技术问题。

本发明是通过以下技术方案实现的，本发明包括：细胞培养装置系统。细胞装置系统由接种口，取样口，填料口，细胞培养装置，截滞装置，可移动载体组成。培养基通过填料口进入细胞培养装置内部，从接种口加入少量已经带有细胞的可移动载体或者细胞作为种子，再从填料口加入适量的空载可移动载体。经过一段时间培养后，绝大部分或全部可移动载体长满细胞时，通过取样口用吸管将可移动载体吸取出来。将吸取出来的可移动载体分成若干等份，作为传代培养的种子。当最后一次传代培养结束时，将所有长有细胞的可移动载体从培养装置中取出，经酶解消化及吹打过程收获细胞。

本发明实施时，培养基通过填料口进入细胞培养装置内部，以带有细胞的可移动载体或者细胞作为种子从接种口加入，再从填料口加入适量的空白可移动载体。经过一段时间培养后，当绝大部分或全部可移动载体长满细胞时，通过取样口用吸管将可移动载体吸取出来。将吸取出来的可移动载体分成若干等份，作为传代培养的种子，或经酶解消化及吹打过程进行收获。

本发明所述可移动载体细胞可以形成悬浮或固定床培养系统，用做种子的细胞由于没有经过酶解消化及吹打等过程，细胞活性没有受到破坏，并且最大限度的降低了染菌的危险。利用可移动载体作为细胞贴壁的支持物，使得收获细胞非常方便，为规模化培养提供可能的途径。

与现有技术相比，本发明将细胞酶解消化及吹打等过程均在培养系统之外进行，使得传代过程中细胞不会受到损伤，实现了细胞培养和收获的分离，简化了细胞培养的操作过程，降低了染菌风险，提高了工作效率。

附图说明

图1为本发明结构示意图；

图2为本发明内置截滞装置；

图3为本发明外置截滞装置。