[发明专利]完全弗氏佐剂在制备胫骨炎症痛模型中的用途

说明书

技术领域

本发明属生物技术领域，涉及骨炎症痛模型，尤其涉及完全弗氏佐剂(CFA)在制备胫骨炎症痛模型中的用途。

背景技术

骨髓炎是一种常见病，由于炎症反复刺激骨膜引起的剧痛严重影响了患者的生活质量。然而目前对骨炎症引起的疼痛的研究仍鲜见报道，因此应用简单易行的方法建立稳定的骨炎症模型具有重要的实践意义。骨炎症痛模型的建立将为研究骨髓炎引起的疼痛提供了一种有价值的动物模型。

完全弗氏佐剂(CFA)是一种常用的致炎剂，现有技术公开了完全弗氏佐剂(CFA)被广泛应用于脚掌皮肤、踝关节炎症痛等慢性疼痛模型的制作，尚未见有报道可应用CFA制作骨炎症痛模型。

骨炎症痛模型的建立能为开展骨癌痛的研究提供很有价值的对照模型。癌症引起的疼痛即癌症痛，是临床上常见的慢性病理性疼痛之一，据有关观察得知，约三分之一的晚期癌症患者都会发生骨转移，肿瘤引起的疼痛已严重影响了患者的生活质量。目前，临床实践中，由于对癌痛机理认识不足，加之各种药物、疗法的诸多局限性，致使相当一部分的癌痛得不到理想控制。

近年来的研究表明，癌痛是一种机理复杂的慢性疼痛，与神经痛、炎症痛既有相似但又有不同之处，提示癌痛可能同时具有神经痛和炎症痛两种因素。以往的研究均是采用癌痛与脚掌或深部组织炎症痛模型进行比较研究，其中，有研究表明皮肤等浅表组织与关节、肌肉等机体深部组织感觉纤维投射不同，因此认为，机体浅表组织与深部组织的炎症疼痛机理上存在差别。由此可见，采用脚掌或深部组织炎症痛模型与癌痛进行比较所得结论尚存在一定的局限性。

发明内容

本发明的目的是提供完全弗氏佐剂(CFA)在制备胫骨炎症痛模型中的用途。

本发明的进一步目的是提供应用完全弗氏佐剂(CFA)制备的胫骨炎症痛模型。

本发明的应用CFA制作骨炎症痛模型，能为开展骨癌痛研究提供更合适的骨炎症对照模型，也为骨炎症痛研究提供一个有用的实验动物模型。

本发明通过下述方法制备所述的骨炎症痛模型：

实验动物麻醉以后，膝关节部位剔毛，皮肤消毒，膝关节屈曲状态下，采用本领域常规方法技术将CFA置入实验动物胫骨骨髓腔内后，碘敷消毒，继续饲养2～16天即建成胫骨炎症痛模型。

本发明中，采用的实验动物优选为大鼠，更优选SD或者Wistar大鼠，体重100～300克。

具体的，所述的大鼠经8％水合氯醛腹腔注射麻醉后，膝关节部位剔毛，皮肤以碘敷或70％酒精消毒，膝关节屈曲状态下，在膝关节处(髌韧带边缘)沿胫骨纵轴走向往胫骨远端腔内，置入CFA5～30ul，碘敷消毒继续饲养2～16天即建成胫骨炎症痛模型。

本发明实验中，实验大鼠取膝关节屈曲状态，CFA置入点紧贴大鼠膝关节膑韧带的外侧或内侧斜至胫骨髁间隆起处，CFA置入方向与胫骨纵轴方向一致。

本发明实验中，所述的CFA制备骨炎症痛模型在无菌条件下进行。

本发明对应用CFA制备的骨炎症痛模型进行了胫骨组织病理和行为学指标测试，所述的行为学指标包括：热痛阈值变化、机械痛阈值变化等相关指标，结果显示，实验鼠的炎症显著，行为学指标水平较低。

本发明采用CFA制得胫骨炎症痛模型。该骨炎症痛模型将为骨癌痛研究尤其是癌痛的机制研究提供有价值的骨炎症痛对照模型；为研究临床骨髓炎引起的疼痛提供了有价值的实验模型，用时丰富了慢性疼痛实验动物模型类型，具有重要的学术研究价值和应用前景。

附图说明

图1为胫骨炎症痛模型第2天的大鼠胫骨HE病理切片，

其中，A、B为生理盐水组，C、D为CFA组第2天，E、F为CFA组第14天。

图2为胫骨炎症痛模型大鼠CFA接种侧后肢机械性痛阈变化情况。

图3为胫骨炎症痛模型大鼠CFA接种对侧后肢机械性痛阈变化情况。

图4为胫骨炎症痛模型大鼠CFA接种侧后肢脚掌热痛阈变化情况。

图5为胫骨炎症痛模型大鼠CFA接种对侧后肢脚掌热痛阈变化情况。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此：

实施例1

1.材料和方法：

致炎剂：完全弗氏佐剂(Complete Freund′s adjuvant，CFA)，购自Sigma-Aldrich中国分公司；

动物：SD雌性大鼠，体重140～160克，由中国科学院上海实验动物中心提供；