[发明专利]牡丹组织培养诱导成芽的方法

权利要求书

1.一种牡丹组织培养诱导成芽的方法，其特征在于：所述的方法包括如下步骤：a、用杀菌剂将牡丹植株处理后用基质填充，用塑料膜保湿并冷藏；b、待牡丹即将解除休眠时，取其鳞芽剥去外层包叶后灭菌，并用无菌水冲洗；c、在无菌环境下，剥开鳞芽，切掉其基部2-4张芽内小叶片和芽内上部叶的叶尖部分，将其余部分接种于固体培养基中培养；d、将接种后的外植体置于培养温度为25±2℃、并具有一定光照条件的环境下培养形成无菌芽。

2.根据权利要求1所述的一种牡丹组织培养诱导成芽的方法，其特征在于：a步骤中，用木屑和苔藓作填充基质，用杀菌剂对基质进行消毒处理，并保持55％-65％的湿度，用百菌清杀菌剂溶液将待处理植株整株浸泡后捞出凉干，将牡丹植株2～3株为一组捆绑后置于塑料袋中，植株四周用消毒好的基质填充，将牡丹植株移至冷库或冰箱内冷藏，冷藏温度为0～-2℃，冷藏时间为15-30天。

3.根据权利要求1所述的一种牡丹组织培养诱导成芽的方法，其特征在于：b步骤中，牡丹解除休眠的时间为15-30天，取健壮鳞芽，剥去外面2层鳞片，用75％酒精处理40秒，再用饱和漂白粉液或10％-15％的活性氯浓度为5.2％的次氯酸钠液灭菌15-25分钟，用无菌水冲洗4-5次。

4.根据权利要求1所述的一种牡丹组织培养诱导成芽的方法，其特征在于：c步骤中，固体培养基中各成分的重量百分比为：0.0825～0.1650％的硝酸铵、0.10～0.2％的硝酸钾、0.04～0.05％的氯化钙、0.03～0.04％的硫酸镁、0.010～0.02％的磷酸二氢钾、0.0278～0.0556％的硝酸钙；0.003～0.004％的乙二氨四乙酸二钠、0.002～0.003％的硫酸亚铁、0.002～0.003％的硫酸锰、0.0008～0.0010％的硫酸锌、0.0006～0.0007％的硼酸、0.00008～0.00010％的碘化钾、0.000025～0.00003％的钼酸钠、0.0000025～0.000003％的硫酸铜、0.0000025～0.000003％的氯化钴、0.01～0.02％的肌醇、0.00005～0.00006％的维生素B1、0.00005～0.00006％的烟酸、0.00005～0.00006％的维生素B6、0.0002～0.0003％的甘氨酸、0.05～0.1％的水解乳蛋白、3～4％的蔗糖、0.65～0.7％的琼脂、0.00015～0.00030％的6-苄氨基嘌呤、0.00002～0.00004％的萘乙酸、0.00003～0.00006％的赤霉素、0.08～0.2％的聚乙烯聚吡咯烷酮或0.05-1.0％的聚乙烯聚吡咯烷酮和0.05～0.1％的活性碳，余量为水，各成分的重量百分比之和为100％，固体培养基的pH值为5.8～6.0。

5.根据权利要求1所述的一种牡丹组织培养诱导成芽的方法，其特征在于：d步骤中，光照强度2000Lx～3000Lx，光照时间12小时/天。