[发明专利]高纯度沉香四醇和4＇-甲氧基沉香四醇的分离制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的分离制备方法，尤其涉及一种应用高速逆流色谱法(HSCCC)分离制备高纯度沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的方法。

技术背景

沉香为瑞香科植物白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含树脂的木材，称为国产沉香、土沉香、沉水香，其味辛、苦，性微温，具行气止痛、温中止呕、纳气平喘的功效，用于胸腹胀闷疼痛、胃寒呕吐呃逆、肾虚气逆喘急。

国产沉香化学成分的研究直到80年代才开始起步，其化学成分大体上可分为3类，即倍半萜类成分、芳香族成分和2-(2-苯乙基)色酮类，其中2-(2-苯乙基)色酮类物质具有不同程度的抗过敏作用，为其活性成分之一。沉香醇提物中含有多种2-(2-苯乙基)色酮衍生物，其中4′-甲氧基沉香四醇和沉香四醇的含量较高，与沉香木的质量等级有着密切关系，可以作为沉香质量控制的指标性成分。

沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇两个化合物在结构上极为相似，因此传统的分离方法很难将其直接分开，且4′-甲氧基沉香四醇一般以其衍生物的形式分离得到。

沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的结构式如下所示：

沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的化学结构式

高速逆流色谱技术(High-speed Counter-current Chromatography，HSCCC)是20世纪90年代发展起来的一种新型液-液色谱分离方法。其原理是利用螺旋柱在行星运动时产生的离心力，使互不相溶的两相不断混合，同时保留其中的一相(固体相)，利用恒流泵连续输入另一相(流动相)，随流动相进入螺旋柱的溶质在两相之间反复分配，按分配系数的次序，被依次洗脱。在流动相中分配比例大的先被洗脱，反之，在固体相中分配比例大的后被洗脱。不同于传统液相色谱法，HSCCC分析方法不使用固相载体，因而避免了有效成分被固相载体的不可逆吸附和峰形拖尾等缺点；样品粗提物可直接进样分离，可以高效、快速和大制备量分离，分离纯化与制备可同步完成，有机溶剂消耗少，无损失、无污染。基于以上优点，HSCCC色谱仪无论是作为分析型仪器还是制备型仪器，在天然产物上具有广阔的开发前景和实际的应用意义，它可以从复杂的天然粗制品中提取不同特性的有效成分，为天然药物的发展提供了有利条件。目前，国内外学者利用HSCCC已经成功的分离提取天然药物中黄酮、生物碱、蒽醌类衍生物、皂甙等有效成分。因此，HSCCC是分离沉香中的结构极为相近的有效成分--2-(2-苯乙基)色酮衍生物的较好手段。

在本发明之前，还没出现应用高速逆流色谱法(HSCCC)分离出高纯度沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的公开报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种高纯度沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的高速逆流色谱分离制备方法。

为了解决上述技术问题，本发明通过如下技术方案实现：

一种高纯度沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇的高速逆流色谱分离制备方法，该方法包括如下步骤：

(1)制备沉香粗提物作为进样物；

(2)配制构成固定相、流动相的两相溶剂体系，该溶剂体系由四个组分A，B，C，D组成，A组分为正构烷烃、环烷烃或卤代烷烃，B组分为卤代烷烃，C组分为脂肪醇或脂肪酮，D组分为水，将该溶剂体系混匀静置分层后，以上相为固定相，下相为流动相；

(3)使高速逆流色谱仪分离柱中充满固定相；

(4)使主机转动，然后将流动相泵入柱内，或将固定相和流动相同时泵入柱内，再使主机转动；

(5)由进样阀进样，根据紫外检测吸收峰接收目标组分，经分离后可得到沉香四醇和4′-甲氧基沉香四醇。

步骤(2)中，所述的正构烷烃为正庚烷或正己烷；所述的环烷烃为环己烷；所述的卤代烷烃为四氯化碳或氯仿；所述的脂肪醇为甲醇、乙醇或异丙醇，所述的脂肪酮为丙酮。

所述的溶剂体系中A，B，C，D四项组分的体积比依次为(0-1)∶(1-4)∶(1-4)∶(1-3)，例如0.2∶3.8∶2.6∶2.4或1∶3∶3∶2等。溶剂体系优选：A组分为正己烷或四氯化碳，B组分为氯仿，C组分为甲醇，D组分为水。当其中的A组分比例变为0时，溶剂体系可变为氯仿-甲醇-水体系。溶剂体系优选氯仿-甲醇-水体系且优选体积比为4∶2.6∶2.4，以上相为固定相，下相为流动相。