[发明专利]因子Ⅶ多肽的液体组合物

说明书

本申请是申请号为028258770(PCT/DK2002/000895)、申请日为 2002年12月20日、发明名称为“因子VII多肽的液体组合物”的中 国专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及包含因子VII多肽的液体含水组合物以及制备和使用 该组合物的方法。本发明更特别涉及对化学和/或物理降解稳定的液体 组合物。

背景技术

已经鉴定了凝血过程涉及的多种因子，包括血浆糖蛋白因子VII (FVII)。血管壁受损后，暴露于循环血中的组织因子(TF)与循环中存 在的、相当于约1％FVII蛋白质总量的FVIIa之间形成复合物，从而 启动止血。FVII主要以单链酶原存在于血浆中，由FXa断裂成双链 活化形式FVIIa。重组的活化因子VIIa(rFVIIa)已开发为前止血剂 (pro-haemostatic agent)。因抗体形成而不能利用其它凝血因子产品治 疗的出血血友病受试者，给予rFVIIa可产生快速、高效的前止血反应 (pro-haemostatic response)。FVIIa也可以成功治疗因子VII缺陷受试 者、或凝血系统正常但过量流血的受试者的出血。

希望有适合保存和输送的给药形式的因子VIIa。理想上药物产品 以液体保存和给药。或者，药物产品是冻干的，例如冷冻干燥，然后 就在患者使用之前加入合适稀释剂重新溶解。理想上药物产品具有足 够稳定性，可以长期保存，即6个月以上。

通常根据蛋白质药物在给药形式中的稳定性，来决定使最终药物 产品保持液体抑或冻干。蛋白质稳定性特别受到以下因素影响，例如 离子强度、pH、温度、冷冻/融化的重复循环以及受到剪切力。活性 蛋白质可因物理不稳定性包括变性和凝聚(可溶性及不可溶性凝聚物 形成)、以及化学不稳定性包括例如水解、脱酰胺作用和氧化作用而丧 失，仅举几个例子。蛋白质药物稳定性的一般综述参见例如Manning 等人，Pharmaceutical Research 6：903-918(1989)。

虽然广泛理解可能发生蛋白质不稳定性，但不可能预测特定蛋白 质的特定不稳定性问题。以上任何不稳定性均可导致形成活性降低、 毒性增加和/或免疫原性提高的蛋白质副产品、或衍生物。实际上，蛋 白质沉淀可能引起血栓形成、剂量形式和数量的不均一性以及注射器 阻塞。此外，翻译后修饰例如某些N端谷氨酸残基的γ羧基化以及添 加糖侧链产生可能在保存期间对修饰敏感的潜在位点。因子VIIa特异 性的丝氨酸蛋白酶也可能因自身催化而发生片段化(酶促降解)。因此， 任何蛋白质组合物的安全和效率与其稳定性直接相关。液体形式保持 稳定性通常与冻干形式不同，因其分子运动大大增加，从而提高了分 子相互作用的几率。浓缩形式保持稳定性也不同，因为高蛋白质浓度 易于形成凝聚物。

开发液体组合物时，要考虑很多因素。短期，即6个月以下，液 体稳定性一般取决于避免总体结构性变化，例如变性和凝聚。文献中 描述了针对许多蛋白质的的这类方法，也存在许多稳定剂的例子。众 所周知，有效稳定某一蛋白质的试剂实际上使另一种不稳定。一旦使 蛋白质的总体结构性变化稳定，形成长期稳定(例如超过6个月)的液 体组合物则取决于进一步稳定蛋白质不受特异性针对该蛋白质的各类 降解。更特异性的各类降解可能包括，例如二硫键错乱、某些残基氧 化、脱酰胺作用、环化。尽管未必可能确切指出各个降解种类，但发 展了测定方法来监控精细变化，以便监控特定赋形剂独特稳定目的蛋 白质的能力。

除了稳定性考虑之外，通常选择由各个世界医学管理机构批准的 赋型剂。希望组合物的pH在注射/输注时位于生理合适范围内，否则 可能引起疼痛和不适。