[发明专利]一种检测乳蛋白含量的光激化学发光免疫定量试剂盒及方法

权利要求书

1.一种检测乳蛋白的光激化学发光免疫定量试剂盒，其特征在于其包括：乳蛋白抗体包被的发光微粒、生物素标记的乳蛋白抗体、亲和素包被的感光微粒以及缓冲液溶剂。

2.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的缓冲液溶剂为PH8.025mM HEPES缓冲液。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述的PH8.025mM HEPES缓冲液每1000ml含有HEPES 6g，BSA 1g，Glycer 100g，Dextran-500 1g，Triton X-100 5g，EDTA-Na-2H2O 0.372g，Proclin-300 0.5g。

4.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的乳蛋白抗体包被的发光微粒由下述方法制得：

1)混合：将发光微粒与乳蛋白抗体混合于MES缓冲液中，其中发光微粒的浓度为10～40mg/ml；

2)反应：加入MES缓冲液配制的NaBH₃CN溶液混合并反应；

3)封闭：加入MES缓冲液配制的Glycin及NaBH₃CN溶液，混匀反应后，再加入BSA溶液封闭；

4)清洗产物，获得乳蛋白抗体包被的发光微粒。

5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于步骤1)中每1mg发光微粒加入0.05～2mg的乳蛋白抗体。

6.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于所述的MES缓冲液的浓度为0.05M、pH为6.0。

7.如权利要求1所述的试剂盒，其特征在于所述的乳蛋白选自酪蛋白、乳清蛋白和乳铁蛋白。

8.一种采用如权利要求1～7任一项所述的试剂盒检测乳蛋白的光激化学发光免疫定量方法，其特征在于包括下列步骤：

1)在反应孔中加入稀释后的待测样品、加有缓冲液溶剂的乳蛋白抗体包被的发光微粒混悬液及生物素标记的乳蛋白抗体混悬液，获得初始反应溶液，充分混合；

2)加入加有缓冲液溶剂的亲和素包被的感光微粒混悬液获得最终反应溶液进行反应；

3)激发光照射反应孔，测量每个反应孔发光光子量获得光信号值。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于步骤1)中的乳蛋白抗体包被的发光微粒混悬液的浓度为50μg/ml，生物素标记的乳蛋白抗体混悬液的浓度为4μg/ml；步骤2)中的亲和素包被的感光微粒混悬液的浓度为80μg/ml。

10.如权利要求8所述的方法，其特征在于步骤3)所述的激发光光源波长范围为600～800nm；发射光检测波长范围为500～680nm。