[发明专利]一种用于预报人体发生异常增殖或肿瘤发生风险的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于检测方法领域，具体涉及一种用于预报人体异常增殖或肿瘤发生风险的检测方法。

背景技术

生物个体在各种因子的刺激下使细胞分裂活跃，细胞数量增多，产生各种疾病，称之为异常增生，如代偿性增生、再生性增生、内分泌性增生等。异常增生与肿瘤发生密切相关。因此，有效检测或预报异常增生对预报异常增殖或肿瘤发生风险具有十分重要的意义。然而，目前国内外预报异常增生的检测方法未见报道。国内外临床使用的肿瘤标志物主要用于检测肿瘤形成后抗体或蛋白水平，不能用于预报异常增殖或肿瘤发生风险。

硫氧还蛋白系统包括硫氧还蛋白还原酶(Thioredoxin reductase，TrxR)、硫氧还蛋白(thioredoxin，Trx)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate，NADPH)，该系统在肿瘤的发生、发展、转移、浸润、耐药、肿瘤血管发生等方面发挥着重要作用。已有研究表明，硫氧还蛋白系统与癌症的关系密切：1)Trx和TrxR为癌症的标志性物：TrxR在肿瘤细胞中表达量是正常组织的10倍。Turunen等通过免疫组化的方法研究了Trx和TrxR在乳腺癌患者体内的表达情况，结果是Trx和TrxR在患者细胞质中的阳性率分别为67％和59％，在细胞核中的阳性率为55％和6％。并且，Trx在细胞核和细胞质中均为阳性的乳腺癌患者的癌细胞增殖很快，病程很短。Lincoln等采用免疫细胞化学法测定TrxR在人原发乳腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、结肠直肠癌及恶性黑色素瘤中的定位与表达，结果显示，侵袭力强的肿瘤过度表达TrxR，且增殖力强、凋亡率低、转移力高。Yoo MH等人完成的肿瘤细胞TrxR1基因敲除实验证明，TrxR1在肿瘤细胞中是必不可少的；2)Trx系统参与肿瘤发展的不同阶段，并表现出在肿瘤细胞中过量表达、促进肿瘤增殖、表达促存活信号和启动促存活过程等特点。因此，检测机体的TrxR水平对预报异常增殖或肿瘤发生具有非常重要的作用。

CN1166651C、CN1281593C、CN1242999C、CN1280279A、CN1704408A、CN1704409A、CN1704410A、CN1853627A、CN1990475A和CN200910077161.X分别公开了“具有抗炎和抗肿瘤作用R-双或糖苯丙异硒唑取代化合物”、“苯并异硒唑衍生物的免疫调节和生物治疗作用”、“苯并异硒唑衍生物及其应用”、“双苯并异唑酮类化合物及其合成和应用”、“异硒唑酮类化合物和其配合物及其应用”、“具有抗纤维化及抑制明胶酶活性的化合物及其应用”、“苯并异硒唑酮衍生物及其制备方法与应用”、“双苯并异硒唑乙烷环糊精或环糊精衍生物包合物及其制备方法和其用途”、“取代苯并异硒唑酮类化合物及其用途”、“硫氧还蛋白还原酶抑制剂化合物及其制备方法和其应用”。这些申请或专利所公开的内容均作为本申请的参考。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于预报人体异常增殖或肿瘤发生风险的检测方法，所述检测方法包括测定样品(如人血或组织)中的下述指标：

1)用DTNB直接测定样品中总巯基含量；

2)采用特异性的硫氧还蛋白还原酶抑制剂化合物，选择性地抑制样本中的硫氧还蛋白还原酶活性后，再用DTNB测定样品中其他巯基物质的含量，所述的特异性的硫氧还蛋白还原酶抑制剂化合物为具有TrxR抑制活性的硒啉类化合物，优选为具有下述I-X结构的硒啉类有机硒化合物：

其中，有机硒化合物I-X的制备、确认和应用可全文参考CN200910077161.X所公开的技术内容；

3)用总巯基含量减去其他巯基含量，即得样品中的TrxR的含量和活性。

进一步，所述样品选自血液或组织，优选为血液。

本发明采用特异性的TrxR抑制剂抑制TrxR活性，通过背景扣除法测定生物样本中的TrxR活性，来预报人体异常增殖或肿瘤发生风险。