[发明专利]一种利用液体培养基附以通透性基质诱导越桔试管生根的方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养快速繁殖技术领域，具体涉及一种借助液体培养基附以通透性基质诱导越桔试管生根的方法。

背景技术

越桔又名蓝莓、蓝浆果，为杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vaccinium)灌木类小浆果果树。越桔果实果肉细腻，种子极小，甜酸适口，香气清爽宜人。果实内特有的越桔花青素、熊果苷、SOD等物质具有提高视力、抗衰老、消除疲劳和防癌等功效，日本和美国都将越桔列于抗癌食品的前列，被誉为“21世纪功能性保健桨果”和“水果中的皇后”。越桔不仅是鲜食佳品，还可深加工成果汁、果酱、果酒和儿童及老年人保健食品等高附加值产品，并被国际粮农组织列为人类五大健康食品之一，被美国最有影响的健康杂志《Prevention》誉为“神奇果”(於虹等，2003)，近年来风靡欧美及日本。

越桔在美国、加拿大已有近百年改良、栽培、种植历史，我国于上世纪90年代开始从美国、加拿大引进优良越桔品种，并开展了育苗快繁研究，但常规繁育方法扩繁推广慢，组织培养离体快繁的研究，多数作者报道：越桔试管生根困难、生根率低、发根周期长、移栽成活率低(Rowland et al.，1992；Dweikatet al.，1998；王侠礼等，2003；刘树英等，2004；陶建敏等，2006)，制约了优良品种的产业化育苗进程，因此，选择一种高效、快捷的诱导生根方法对越桔的快速繁殖及推广种植显得十分重要。

本发明经研究发现，采用液体培养基附以滤纸团、脱脂棉球、蛭石粒通透性基质，既解决了上述问题，又可以有效节约生产成本，加快产业化育苗，本案油然而生。

参考文献：

[1]於虹，王传永，吴文龙.2003，蓝浆果栽培与采后处理技术.北京：金盾出版社，1-2

[2]王侠礼，钟士传，郑亚芹，等.美国高灌蓝莓的引进及微体快繁技术研究[J].中国种业，2003(12)：40-41

[3]刘树英，安伟，孔令学，等.兔眼越橘芽的诱导及再生[J].吉林农业大学学报，2004，26(6)：632-635

[4]陶建敏，耿其芳，庄智敏，等.蓝浆果叶片高效再生体系的建立[J].西北植物学报.2006，26(3)：610-614

[5]Dweikat M，Lyrene P M.Adventitious shoot production from leaves of blueberry cultured in vitro.HortScience，1998，23：629

[6]Rowland L J，Ogden E L.Use of a cytokinin conjugate for efficient shoot regeneration from leaf ection ofhigh blueberry.Hort Science，1992，27(10)：1127-1129

发明内容

本发明的目的是解决上述现有技术缺陷，为工业化规模快速繁殖提供越桔的试管生根及移栽方法。

本发明的技术方案是：

一种利用液体培养基附以通透性基质诱导越桔试管生根方法，其工艺步骤包括生根培养基的配制、生根培养与瓶苗移栽：

(1)生根培养基配方及制备

①培养基基质：制备0.8cmx1.2cm的滤纸团或脱脂棉球，选0.2cmx0.6cm大小的粒状蛭石，经洗洁净和自来水洗净，置流水下冲洗20～30min后，于烘箱中烘干或自然晾干；

②诱导生根培养液：1/2WPM+IBA1.0～5.0mg.L^-1+食用白糖2％+pH5.0～5.2营养液；

③分装和灭菌：每瓶加入已浸透生根培养液的滤纸团或脱脂棉球6～10个或蛭石20～30粒，再注入诱导生根培养液3～5ml，加盖后，在1.2Kg/cm²、121℃饱和蒸汽压力下灭菌20min。

(2)生根培养及培养条件

选继代培养40d、高3～4cm的健壮无根苗转入生根培养基中，首先在黑暗条件下培养7～10d，随后转到12h/d间歇光照下10d左右可诱导产生不定根，再培养10d可左右形成3～7条、根长0.5～2cm的根系。

(3)瓶苗移栽及管理

试管苗在生根培养基上培养约30d，苗高3～6cm、根长0.5～2cm时开瓶直接移栽到草炭土和苔藓混合基质的苗床上培育，草炭土和苔藓的体积比为1∶1。

上述生根培养时的培养室温度为24±2℃，12h/d间歇光照时的光照强度为1500～2000lx。