[发明专利]一种利用程序温度调控的繁茂膜海绵组织人工培养的方法

权利要求书

1.一种利用程序温度调控繁茂膜海绵组织人工培养的方法，其特征在于：

可按如下步骤操作：

(1)繁茂膜海绵的预处理：取处于复苏期的繁茂膜海绵，将海绵表面泥沙和附着生物除去、洗净后，室温条件下，放入海绵缸中预养，暂养过程使用沙滤天然海水，暂养6-9天，每2-3天换水1次；

(2)繁茂膜海绵的固定和基本培养条件：选取质量在1-4g的健康洁净的繁茂膜海绵组织，采用“十字法”用细线将海绵组织固定在玻璃培养皿的表面；将固定好的海绵放入玻璃缸中，沙滤天然海水养殖，每10升的沙滤天然海水中可放置总持量为10-20g的海绵组织，通过气泵充空气，喂食金藻，无阳光直射的自然光照条件下，一周换水2-3次；

程序温度调控方法：从开始培养时起将沙滤天然海水的温度设定为15-17℃，每隔两天上调0.8-1.2℃，直至24-26℃后维持8-12天；之后每隔两天下调0.8-1.2℃，一直降到15-17℃；之后每天降1.8-2.2℃，一直降到0-2℃，完成了繁茂膜海绵的一个自然条件下一年的生长周期。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：在上述实验室的条件下人工调控海绵一年的生长周期，可随时采集不同时期的海绵组织用于生产或研究。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：所述玻璃缸里放置加热棒，玻璃缸外是冷水循环系统；用温度计显示玻璃缸中沙滤天然海水的水温。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(2)中气泵的充气强度为1-2L air/L sea water/min；步骤(2)中每10升的沙滤天然海水中每天喂食1ml的金藻藻液，折合成金藻藻粉为0.02-0.04g。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中所述复苏期的繁茂膜海绵是，于三月中旬海绵开始处于复苏期时，去大连凌水桥潮间带地区野外采集的海绵；采集时，选择表面污泥较少、颜色较鲜艳，体表相对平坦的海绵，将海绵从礁石上剥离后，立即放入盛有天然海水的小桶内，带回实验室。

6.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：将海绵表面泥沙和附着生物除去过程为，海绵组织采集回来后在1L沙滤天然海水中加一支2ml的硫酸庆大霉素注射液，浸泡海绵组织，用镊子轻轻地除去海绵表面的赃物。