[发明专利]一种玉米花丝多糖分离与脱色方法

说明书

技术领域

本发明属于植物多糖分离与脱色方法，特别涉及一种玉米花丝多 糖分离与脱色方法。

背景技术

玉米花丝(又名玉米须)多糖味甘、平、无毒，具有降血糖、降 血压、抗癌、抗菌及免疫活性等生理功能。我国玉米花丝资源丰富， 且花丝容易采集，费用低。玉米花丝的功效与花粉相当。在分离提取 过程中，花丝多糖混有色素、蛋白质和一些小分子物质。这些杂质中， 色素对花丝多糖的外观品质有一定的影响，并使多糖的分离、纯化与 结构鉴定更加困难，因此需要将色素除去。在玉米花丝多糖的分离提 取过程中，脱色一直是一个难题。多糖脱色的方法很多，主要有：离 子交换树脂法、大孔吸附树脂法、活性炭吸附法、双氧水脱色、透析 法、有机溶剂法等。然而，每种方法都有其局限性，且对不同的植物 多糖进行脱色，得到的效果也不尽相同。采用活性炭吸附脱色，活性 炭难以除去；采用双氧水氧化脱色，效果不太理想，并且双氧水具有 氧化性，会破坏多糖的生物活性；树脂法、透析法及有机溶剂法对多 糖中的色素的脱除率也不太高。

粉末活性炭具有惊人的比表面积(800～2000m²/g)，当被脱色的 有色物质的分子直径小于或等于活性炭孔的入口直径时，可被活性炭 吸附而起到脱色的效果。本发明利用粉末活性炭对玉米花丝多糖溶液 进行脱色，并利用微孔滤膜除去残存的活性炭，达到分离玉米花丝多 糖并顺利脱色的良好效果。

发明内容

本发明的目的是提供一种玉米花丝多糖分离与脱色的方法。在确 定多糖分离与脱色方法的基础上，对工艺进行优化，以获得脱色效果 好、得率高的玉米花丝多糖。

本发明的技术解决方案是：

一种玉米花丝多糖分离与脱色方法，其特殊之处是：

1)玉米花丝粉碎与酶解

将经过清洗、干燥的玉米花丝进行粉碎；将粉碎后的玉米花丝与 水以质量比1∶10～1∶15的比例混合，加入玉米花丝质量1.0％～1.5％的 纤维素酶，调节至pH值4.5～5.5，45℃恒温水浴，搅拌酶解4.0～5.0h， 得多糖浸提液；

2)活性炭脱色

将酶解后的多糖浸提液过滤后离心，取上清液进行真空浓缩至上 清液体积的1/4～1/3，除去蛋白；将粉末状活性炭加入脱蛋白后的多 糖溶液，活性炭添加量为0.08～0.12g/ml，混合均匀后，45℃恒温水浴 1.0～1.5h；离心后取上清液，利用微孔滤膜进行抽滤1～3次，去除活 性炭残渣，微孔滤膜的孔径大小为0.45～0.80μm；脱色后的花丝多糖 溶液按0.8∶1～1.2∶1的比例添加无水乙醇或甲醇，混匀后离心，沉淀经 真空干燥即得玉米花丝多糖。

本发明将玉米花丝经过粉碎后，利用纤维素酶进行酶解反应，水 浴浸提，过滤后进行离心，取上清液进行真空浓缩，Sevage法除蛋白， 活性炭脱色，去除活性炭残渣，然后用乙醇进行沉淀，得到玉米花丝 多糖。可脱除玉米花丝多糖分离提取时溶液中的色素，效果显著，色 素脱除率可达85～90％，多糖保留率可达83％以上，且工艺简单；同 时有效除去了脱色后多糖溶液中残留的活性炭，保持玉米花丝多糖色 泽的纯正。

具体实施方式

实施例1

将清洗、干燥的玉米花丝粉碎，称取花丝粉末50g，加入花丝质 量1.0％的纤维素酶(酶活2000单位)，按1∶10比例添加蒸馏水，调 节至pH值4.5，45℃恒温水浴，搅拌酶解5h。酶解后的花丝多糖浸 提液用尼龙网或纱布过滤后离心，弃沉淀，取上清液，利用旋转蒸发 仪真空浓缩至1/3体积。Sevage法除蛋白，具体操作为按上一步的上 清液∶脱蛋白试剂(氯仿∶正丁醇＝5∶1)＝5∶1的比例(体积比)混匀， 以3500r/min离心10min，取上清液。将粉末状活性炭加入脱蛋白后 的多糖溶液，活性炭添加量为0.08g/ml(脱蛋白后的多糖溶液)，混 合均匀后，45℃恒温水浴1.5h；以3500r/min离心10min，然后取上 清液，利用微孔滤膜进行抽滤1次，去除活性炭残渣，微孔滤膜的孔 径大小为0.45μm。利用可见分光光度计在470nm处测定多糖溶液脱 色前后的吸光值，并按下式计算脱色率：

脱色率％＝[(脱色前吸光度-脱色后吸光度)/脱色前吸光 度]×100。

以苯酚-硫酸法测定多糖含量。活性炭脱色率为85.8％，多糖保留率 为85.4％。