[发明专利]一种真姬菇单单杂交育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种真菌的杂交育种方法，具体涉及一种高效的真姬菇(Hypsizygus marmoreus)单单杂交育种方法。公开了真姬菇单单杂交育种方法的整个流程及操作要求，包括所需的培养基、亲本的选择、杂交的过程和技术、栽培出菇。

背景技术

真姬菇(Hypsizigus marmoreus)又名玉覃、斑玉覃、海鲜菇、胶玉蘑、鸿喜菇、蟹味菇、假松茸等。隶属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、白蘑科、离褶菌族、玉蕈属，是北温带一种优良的食用菌。真姬菇味比平菇鲜，肉比滑菇厚，质比香菇韧，口感极佳，还具有独特的蟹香味，在日本有“香在松口蘑、味在玉覃”之说。

真姬菇分布在日本、北美和欧洲等北温带地区，是春秋季生木腐菌，主要生长在山毛榉及其他阔叶树的枯木、风倒木和树桩上。真姬菇的蛋白质中氨基酸种类齐全，包括8种人体必需氨基酸，其中赖氨酸、精氨酸含量高于一般菇类。并且真姬菇是一种低热量、低脂肪的保健食品，其味鲜美、性平、甘温，有利尿渗湿，健脾止渴之功能，清热平肝之效。口感极佳，常食可提高免疫力、预防衰老、延长寿命，深受广大消费者的喜爱。

真姬菇的需温特性，属中低温型。菌丝生长的适宜温度为22℃-24℃，菇蕾分化的适宜温度为11℃-14℃，子实体成长的适宜温度是14℃-18℃。

担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝，在进行细胞分裂时，于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构。只出现在双核菌丝上。其形成过程是：首先，在细胞的两核之间生出一个喙状突起，双核中的一个移入喙状突起，另一个仍留在细胞下部。两异质核同时分裂，成为4个子核。分裂完成后，原位于喙基部的一子核与原位于细胞中的一子核移至细胞上部配对；另外两子核，一个进入喙突中，一个留在细胞下部。此时细胞中部和喙基部均生出横隔，将原细胞分成三部分。上部是双核细胞，下部和喙突部暂为两单核细胞。此后，喙突尖端继续下延与细胞下部接触并融通。同时喙突中的核进入下部细胞内，使细胞下部也成为双核。经如上变化后，4个子核分成2对，一个双核细胞分裂为两个。此过程结束后，在两细胞分融处残留一个喙状结构，即锁状联合。锁状联合保证了双核菌丝在进行细胞分裂时，每节(每个细胞)都能含有两个异质(遗传型不同)的核，为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准，凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。真姬菇也具有产生锁状联合的特征。

现有的专业蕈菌遗传育种的方法，如《覃菌遗传育种》张树挺、林芳灿介绍，流程如下：

(1)亲本的选择。选择优点多、能互补、亲缘关系较远、其中一个是当地大面积推广的品种。

(2)孢子采集、孢子稀释涂布、挑单孢。

(3)镜检锁状联合的有无以获得单核菌丝。

(4)单核菌丝配对。

(5)镜检锁状联合的有无以获得杂合子。

(6)杂合子小试、大试和推广。

因为真姬菇具有良好的市场，中国、日本和韩国的一些企业开始在控制温度、湿度、光照和空气交换的人工环境进行工厂化栽培生产，但是真姬菇的菌株选育效率不高。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的高效的真姬菇单单杂交育种方法，通过此方法可以提高优良菌株的选育效率。该发明适用于真姬菇的育种，特别适于真姬菇的工厂化栽培生产。

担子菌亚门中多数担子菌的双核菌丝，在进行细胞分裂时，于菌丝的分隔处形成的一个侧生的喙状结构。只出现在双核菌丝上。锁状联合保证了双核菌丝在进行细胞分裂时，每节(每个细胞)都能含有两个异质(遗传型不同)的核，为进行有性生殖，通过核配形成担子打下基础。锁状联合是双核菌丝的鉴定标准，凡是产生锁状联合的菌丝均可断定为双核。锁状联合也是担子菌亚门的明显特征之一。真姬菇也具有产生锁状联合的特征。应用锁状联合作为区分单核菌丝和双核菌丝的标准。

本发明所需要解决的技术问题，可以通过以下技术方案来实现：

一种真姬菇单单杂交育种方法，包括：

(1)亲本的选择：根据育种目标选择合适的亲本，熟悉各亲本的特点，熟悉其优缺点，亲本之间有较远的亲缘关系，有好的配合力；

(2)孢子采集、孢子稀释涂布、挑单孢、镜检锁状联合的有无以获得单核菌丝；无锁状联合的为单核菌丝；

所述孢子采集主要采用钩悬法收集孢子；

所述孢子稀释涂布为无菌操作，涂布浓度为在40倍显微视野中有2～3个孢子，在16～21℃培养8-10天；

所述挑单孢在稀疏的部位挑取单孢；