[发明专利]简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种简单纯芽胞杆菌，具体地说，是一种分离于西藏具促生和防病作用的低温适生简单纯芽孢杆菌(Bacillussimplex)RJGP41及其在防治大白菜软腐病害中的应用。 

背景技术

大白菜软腐病是大白菜三大病害之一，是由欧文氏菌引起的，这种细菌普遍存在于土壤里，靠雨水和灌溉水传播，病菌只要与白菜伤口接触，就能侵染发病，如不及时防治，将会直接影响大白菜的产量和品质。目前对于作物细菌病害包括大白菜软腐病缺乏有效的化学药剂，而且化学农药的大量使用不仅造成了空气、水源、土壤和食物的污染，更重要的是经过化学农药的定向选择使病原菌产生了抗药性，人们迫切希望能够在生物领域寻找到低毒、高效、环境友好的新型农药。植物根围促生细菌(Plant Growth-PromotingRhizobacteria，简称PGPR)因为与植物之间具有良好的互利共生关系，不仅能够诱导植物产生抗病性，而且可以促进植物生长、提高作物产量，因而成为倍受瞩目的一类生防细菌，开发和利用专门用于防大白菜软腐病的生防细菌具有广阔的应用前景。 

发明内容

本发明目的在于提供一种对于大白菜软腐病害具有较好防治效果、并能有效促进作物生长的简单纯芽孢杆菌。 

上述目的是通过如下技术方案实现的： 

一种简单纯芽孢杆菌，分类命名为短小芽孢杆菌(Bacillussimplex)RJGP41，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏日：2009年11月2日，保藏号：CGMCC No.3381。 

简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41 CGMCC No.3381是从西藏日喀则市江当乡郭安村的蒲公英根围土中分离，经平板对峙筛选获得。 

简单纯芽孢杆菌(Bacilluss implex)RJGP41 CGMCC No.3381为革兰氏阳性细菌，杆状，能在4℃生长，但不能在50℃生长，不能耐受pH5.7和7％NaCl的培养，接触酶试验、淀粉水解试验、柠檬酸盐利用试验、硝酸盐还原试验、葡萄糖发酵和酪素试验均为阳性，V-P试验、厌氧生长试验和丙酸盐利用试验均为阴性。 

利用PCR技术扩增简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41CGMCC No.3381的16S rDNA序列，获得长度为481bp的片段，将测试结果(如序列表所示)与GenBank中已知的16S rDNA进行同源性比较，发现与Bacillus simplex FJ455076.1的相似性最高，为94％。 

根据菌体的革兰氏染色、菌落的形态特征、菌株的生理生化性质以及16S rDNA序列分析的结果，参照《芽孢杆菌属》(蔡妙英等译，农业出版社，1988年)和《微生物分类学》(张继忠，上海复旦大学出版社，1995年)的检索表进行检索，将该菌株鉴定为简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)，命名为RJGP41。 

含有简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41C GMCC No.3381的菌剂也属于本发明的保护范围。 

简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41 CGMCC No.3381的应用方法为发酵培养→稀释→喷洒→效果测定。 

简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41 CGMCC No.3381的发酵培养基组成为：葡萄糖20g/L，L-谷氨酸5g/L，MgSO₄0.5g/L，KCl 0.5g/L，KH₂PO₄ 1g/L，Fe₂SO₄·6H₂O 0.15mg/L，MnSO₄·H₂O 5.0mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.16mg/L，其余为过滤水，并调节至pH7.0。 

简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41 CGMCC No.3381对欧文氏菌有显著的抑菌效果，对拟南芥、玉米和大白菜有显著的促生效果。 

附图说明

图1为实施例2简单纯芽孢杆菌(Bacillus simplex)RJGP41CGMCC No.3381的芽胞图片；