[发明专利]短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种短小芽胞杆菌，具体地说，是一种分离于西藏 具促生和防病作用的低温适生短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus) NMCC46及其在防治大豆根腐病害中的应用。

背景技术

大豆根腐病目前在我国大豆产区均有发生，例如在我国大豆主 产区东北地区，田间病株率为30％～40％，低洼地和重茬地病株率 达70％以上，最高死苗率达15％以上；而在东部土壤潮湿地区， 一般年份大豆生育前期(开花期以前)病株率为75％左右，病情 指数为35％～50％，多雨年份病情指数可达60％以上，严重威胁着 我国大豆生产的安全。长期以来，化学农药一直是防治植物病虫草 鼠害的重要手段，但是农药滥用所带来的地力衰退、环境污染、以 及病原菌产生抗药性等一系列问题，不断促使着人们去生物领域寻 找低毒、高效、环境友好的新型农药。植物根围促生细菌(Plant Growth-Promoting Rhizobacteria，简称PGPR)因为与植物之间具有 良好的互利共生关系，不仅能够诱导植物产生抗病性，而且可以促 进植物生长、提高作物产量，因而成为倍受瞩目的一类生防细菌， 但是目前未见专门用于防治大豆根腐病害的生防细菌的报道。

发明内容

本发明目的在于提供一种对于大豆根腐病害具有较好防治效 果、并能有效促进作物生长的短小芽孢杆菌。

上述目的是通过如下技术方案实现的：

一种短小芽孢杆菌，分类命名为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普 通微生物中心(简称CGMCC)，保藏日：2009年11月2日，保藏 号：CGMCC No.3378。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378， 是从西藏纳木错湖草根围土中分离，经平板对峙筛选获得。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378 为革兰氏阳性细菌，杆状，能在10℃生长，是一种低温适生菌， 在50℃也能生长，能耐受7％NaCl的培养，但不能忍受pH5.7的 培养，接触酶试验、柠檬酸盐利用试验、V-P试验、葡萄糖发酵和 酪素试验均为阳性，淀粉水解试验、硝酸盐还原试验、厌氧生长试 验和丙酸盐利用试验均为阴性。

利用PCR技术扩增短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378的16S rDNA序列，获得长度为482bp的片段， 将测试结果(如序列表所示)与GenBank中已知的16S rDNA进行 同源性比较，发现与Bacillus pumilus EF157741.1的相似性最高， 为94％。

根据菌体的革兰氏染色、菌落的形态特征、菌株的生理生化性 质以及16S rDNA序列分析的结果，参照《芽孢杆菌属》(蔡妙英 等译，农业出版社，1988年)和《微生物分类学》(张继忠，上海 复旦大学出版社，1995年)的检索表进行检索，将该菌株鉴定为 短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)，命名为NMCC46。

含有短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378的菌剂也属于本发明的保护范围。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378 菌株的应用方法为发酵培养→稀释→喷洒→效果测定。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378 的发酵培养基组成为：葡萄糖20g/L，L-谷氨酸5g/L，MgSO₄0.5g/L，KCl 0.5g/L，KH₂PO₄ 1g/L，Fe₂SO₄·6H₂O 0.15mg/L， MnSO₄·H₂O 5.0mg/L，CuSO₄·5H₂O 0.16mg/L，其余为过滤水，并调 节至pH7.0。

短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)NMCC46 CGMCC No.3378 对大豆根腐病菌和酵母菌有显著的抑菌效果，对拟南芥和大豆有显 著的促生效果。

附图说明