[发明专利]甲磺酸达氟沙星脂质体的制备方法及其产品

说明书

技术领域

本发明涉及的是一种兽用药品的制备方法，尤其涉及甲磺酸达氟沙星肺靶向脂质体的制备方法及其产品，属于兽用药品领域。

背景技术

脂质体系指将药物包封于类脂双分子层内形成的微型囊泡，又称为类脂小球或液晶微囊，属于微粒给药体系。其主要成分是磷脂(如磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酸)、磷脂酰丝氨酸等。脂质体作为一种新型的药物靶向制剂，以其包裹药物后，可以改善药物理化性质，增强药物对靶组织的指向性和滞留性，提高药物在局部组织的分布，减少药物用量和治疗成本，降低药物对正常细胞的毒性和提高生物利用度等。60年代末，Rahman等人首先将脂质体作为药物载体应用。经过30多年的研究，由Nexstar公司生产的Ambisome于1989年在爱尔兰投放市场，从而使脂质体技术作为一种新技术进入了医药历史的舞台。由于生物技术药物涵盖面不断拓宽，脂质体作为生物技术药物载体，其应用范围也越来越广。随着社会的发展，人们对环保意识逐渐增强，对畜禽用药的要求也愈来愈高。要求是高效、低残留等。现在人们比较注重研制药物新制剂，因为不可能一味的要求研究新药。随着脂质体在医药领域的应用，它对兽药领域的影响也将越来越广泛。目前，兽用脂质体制剂的研究主要以抗寄生虫、抗病毒、抗感染、微量元素、营养药物为主，已研制成功的或正在研制的兽用脂质体制剂如碘醚柳胺脂质体定向剂、诺贝脂质体注射液、H7亚型禽流感保护性抗原血凝素(HA)基因重组质粒pSVH7脂质体、用CABA/DOPE脂质体包裹新城疫病毒血凝素神经氨酸酶(HN)基因的真核表达质粒pcHNM、猪生长激素脂质体、半胱胺脂质体等。然而，在现有报道的有关兽用脂质体制剂的资料中，研究内容涉及制备工艺、体内外稳定性、药效学研究及临床观察、药物代谢动力学等研究不是很深入，有待进一步加深。

甲磺酸达氟沙星是喹诺酮类化合物第三代产品-氟喹诺酮类药物的一种，是动物专用品种。90年代初由美国辉瑞公司研制开发，于1990年在墨西哥等国家上市，我国于1998年开始应用该药品。该药抗菌谱广，对革兰氏阳性菌、阴性菌、某些厌氧菌、支原体及某些耐药菌株都有较强的抗菌作用，对金黄色葡萄球菌、溶血链球菌、肺炎球菌、嗜肺性军团菌、支原体敏感，对梭状芽孢杆菌、魏氏梭菌、破伤风杆菌、拟杆菌属也敏感，对三甲苄氨嘧啶/磺胺药耐药的细菌，对庆大霉素耐药的绿脓杆菌，耐甲氧苯青霉素的金黄色葡萄球菌及耐泰乐菌素或泰妙灵的支原体均有效果。尤其是对呼吸道主要致病菌的抗菌效果明显优于其他抗菌药物，是治疗畜禽呼吸系统感染性疾病的理想药物。达氟沙星较其他第三代喹诺酮类药物不良反应轻微，但还具有一定的神经毒性、肝毒性和肾毒性，同时存在价格昂贵、生产工艺复杂等问题。目前，临床上常用的制剂有甲磺酸达氟沙星粉剂、溶液剂、注射液等。

发明内容

本发明的目的在于提供一种甲磺酸达氟沙星脂质体的制备方法，由该制备方法所制备得到的甲磺酸达氟沙星脂质体具有肺靶向性强、疗效高、药效长，且能够缓和毒性等特点，为畜禽肺部感染的防治提供一种更为理想的新制剂。

本发明的目的还在于提供一种由硫酸铵梯度法与冻结融解法相结合制备甲磺酸达氟沙星脂质体的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

一种甲磺酸达氟沙星脂质体的制备方法，包括以下步骤：(1)采用硫酸铵梯度法制备空白脂质体；(2)向空白脂质体中加入甲磺酸达氟沙星药液，水浴孵化，过滤，滤液采用冻结融解法反复冻融，即得甲磺酸达氟沙星脂质体。

上述制备方法中，优选的，步骤(1)中所述的空白脂质体包括以下步骤制备得到：将蛋黄卵磷脂(EPC)与胆固醇(CH)混合并加入硬脂酰胺(SA)充分混合均匀，用无水乙醚溶解后经旋转减压蒸发，除去乙醚，得均匀半透明的磷脂膜；真空干燥后加入硫酸铵溶液洗脱，得到空白脂质体；

其中，为了提高空白脂质体的包封率，优选的，将蛋黄卵磷脂(EPC)与胆固醇(CH)按照重量比为3∶2的比例进行混合，所制备得到的空白脂质体具有最优的包封率；加入硬脂酰胺的目的是调节脂质体电荷，本发明人通过大量的试验发现，当所加入硬脂酰胺用量达到蛋黄卵磷脂(EPC)和胆固醇总重量的2.6％时，就可达到调节脂质体电荷目的，从成本和效率方面综合考虑，因此，本发明优选硬脂酰胺其用量为蛋黄卵磷脂(EPC)和胆固醇总重量的2.6％。

此外，在步骤(1)还可以把所得的空白脂质体通过3μm微孔滤膜整粒，并用150mmol/L NaCl溶液室温下透析3次，每次24h。