[发明专利]一种从生物样品中快速分离病毒核酸的试剂盒及方法无效
申请号: | 200910223901.6 | 申请日: | 2009-11-19 |
公开(公告)号: | CN102071186A | 公开(公告)日: | 2011-05-25 |
发明(设计)人: | 赵海峰 | 申请(专利权)人: | 北京金麦格生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 100176 北京市*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 样品 快速 分离 病毒 核酸 试剂盒 方法 | ||
1.一种可自动化提取病毒核酸的试剂盒,其特征在于:包括以下组分:
(1)裂解缓冲液:6M盐酸胍,150mM Tris-HCl,50mM EDTA,200mM NaCl,5%Triton,0.5mM DTT,pH值=7.4;
(2)磁珠;
(3)洗涤缓冲液I:6M盐酸胍,100mM Tris-HCl,500mM NaCl,20mM EDTA,pH值=7.4;
(4)洗涤缓冲液II:70%乙醇;
(5)洗涤缓冲液III:水;
(6)洗脱缓冲液:10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0。
2.一种根据权利要求1所述试剂盒进行病毒核酸提取的方法,其特征在于具体步骤包括:
(1)样品裂解:在含病毒的样品中加入裂解缓冲液,使样品中的病毒粒子裂解;
(2)将步骤(1)得到的混合溶液中加入适量磁珠,样品中的核酸与磁珠结合,然后在外加磁场条件下进行分离,收集磁珠-核酸复合物;
(3)向步骤(2)得到的磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液I,去除未结合物质,然后在外加磁场条件下进行分离,收集磁珠-核酸复合物;
(4)向步骤(3)得到的磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液II,去除杂质,然后在外加磁场条件下进行分离,收集磁珠-核酸复合物;
(5)向步骤(4)得到的磁珠-核酸复合物中加入洗涤缓冲液III,然后在外加磁场条件下进行分离,收集磁珠-核酸复合物;
(6)向步骤(5)得到的磁珠-核酸复合物中加入洗脱缓冲液,将结合在磁珠上的核酸洗脱下来,回收上清液即为纯化的病毒核酸。
3.根据权利要求2所述的方法,其中病毒核酸为DNA或RNA。
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