[发明专利]一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法。竹叶黄酮提取物是从禾本科(Poaceae)竹亚科(Bambusoideae)的竹叶中提取分离得到，有多种生物学功效，在保健品、化妆品及食品添加剂方面应用广泛。

背景技术

竹叶在我国具有悠久的食用和药用历史。新的实验数据表明，竹叶提取物对鼻咽癌、腹腔癌、胃癌、卵巢癌、食道癌等有明显的抗癌活性，有降血脂和降血清胆固醇的作用，有较好的清除活性氧自由基的能力，有显著的抗衰老和抗疲劳作用。竹叶优异的功能归结于它富含黄酮及其甙类以及醛、醇为主的芳香物质以及活性多糖、特种氨基酸及其肽类和多种微量元素等有效活性成分。目前，在世界竹产品总贸易额中，我国竹产品贸易额非常低，仅世界竹产总贸易额的占3％，没有使我国丰富竹类资源优势得到充分利用。为了摆脱我国竹产业高产量、低产值的现状，研究开发高产值竹叶化学成分产品势在必行。

发明内容

本发明的目的旨在以我国资源十分丰富、且尚未得到有效开发利用的竹叶为植物材料，提供一种高效的竹叶黄酮制备方法，并应用于食品、保健品、洗涤用品中。

一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法，其步骤为：

(1)称取粉碎至20目的竹叶粉于圆底烧瓶中，在所述的圆底烧瓶中加入60％的乙醇溶液形成竹叶粉乙醇溶液，所述竹叶粉质量与所述60％的乙醇溶液体积的比值范围为1∶10至1∶8，所述竹叶粉质量单位为克，所述60％的乙醇溶液体积单位为毫升，所述60％的乙醇溶液事先用6M盐酸调pH值至3-4；

(2)将所述竹叶粉乙醇溶液室温放置2小时，使竹叶粉得到充分的浸泡，得到浸泡后的竹叶粉乙醇溶液；

(3)将所述浸泡后的竹叶粉乙醇溶液在电热套中加热至沸腾，加热回流3小时后，将竹叶粉乙醇溶液冷却至35-40℃，倾倒出乙醇溶液，倾倒过程尽量不要将竹叶粉倒出，此乙醇溶液为乙醇第一次提取液；

(4)将倾倒出所述乙醇第一次提取液后剩余的竹叶粉残渣再加入60％的乙醇溶液，所述竹叶粉质量与所述60％的乙醇溶液体积的比值范围为1∶5至1∶6，其中60％的乙醇溶液体积单位为毫升，所述竹叶粉质量单位为克，所述的60％乙醇溶液用6M盐酸调pH至3-4，加热回流2小时，将竹叶粉乙醇溶液冷却至35-40℃，倾倒出乙醇溶液，倾倒过程尽量不要将竹叶粉倒出，此乙醇溶液为乙醇第二次提取液；

(5)将所述乙醇第一次提取液和所述乙醇第二次提取液混合，得到乙醇提取液，将乙醇提取液采用高速冷冻离心机离心除沉淀，所述高速冷冻离心机的转速为每分钟8000转，在20℃的情况下离心30分钟，得到上清液；

(6)将所述上清液在旋转蒸发仪上进行浓缩，脱除溶剂，其中所述旋转蒸发仪真空度为0.09Mpa，水浴温度控制在50-55℃之间，脱除溶剂至脱溶瓶中剩余30％体积溶液，得到浓缩液；

(7)将所述浓缩液慢慢倒入内装树脂的层析柱，所述的层析柱其特征在于事先用蒸馏水洗至流出液清亮，所述的树脂其特征在于是HP-20大孔吸附树脂，控制上样流速为1.5mL/min，1kg竹叶提取后得到的浓缩液对应1kg树脂，即竹叶与树脂的质量之比为1∶1。

(8)依次用50％乙醇水溶液及95％乙醇水溶液上柱洗脱杂质，控制流速2mL/min，用硅胶GF254薄层板在线监控洗脱过程，最后用100％乙醇洗脱产品，收集100％乙醇流出液；

(9)将所述的100％乙醇流出液在旋转蒸发仪上将乙醇脱出干净，旋转蒸发仪真空度0.09Mpa，水浴温度控制在50-55℃，得竹叶黄酮提取物。

附图说明

图1.调酸至pH3-4与不调酸得到的竹叶黄酮乙醇提取液色谱图

图2.经柱纯化得到的毛竹叶黄酮提取物液相色谱图

具体实施方式

以下，关于本发明的竹叶黄酮制备方法，基于实施方式进行说明。

一种经柱纯化制备竹叶黄酮提取物的方法，其步骤为：

(1)称取粉碎至20目的竹叶粉于圆底烧瓶中，在所述的圆底烧瓶中加入60％的乙醇溶液形成竹叶粉乙醇溶液，所述竹叶粉质量与所述60％的乙醇溶液体积的比值范围为1∶10至1∶8，所述竹叶粉质量单位为克，所述60％的乙醇溶液体积单位为毫升，所述60％的乙醇溶液事先用6M盐酸调pH值至3-4；

(2)将所述竹叶粉乙醇溶液室温放置2小时，使竹叶粉得到充分的浸泡，得到浸泡后的竹叶粉乙醇溶液；